【摘 要】
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目的 探索生长抑制蛋白4(inhibitor of growth 4,ING4)的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)和PHD指状结构域(plant homeodomain)在刺激丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)
【机 构】
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华东理工大学生物工程学院,国家人类基因组南方研究中心
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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目的 探索生长抑制蛋白4(inhibitor of growth 4,ING4)的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)和PHD指状结构域(plant homeodomain)在刺激丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)细胞信号通路成员ERK1磷酸化中的作用.方法 通过构建ING4的NLS和PHD结构域突变或缺失重组质粒,将上述质粒分别与ERK1表达载体共转染HEK-293细胞,Western印迹检测ERK1总蛋白和磷酸化ERK1蛋白水平.结果 在HEK-293细胞中,ING4蛋白分别缺失NLS和PHD结构域后,其对MAPK细胞信号通路成员ERK1磷酸化的促进作用均降低,突变ING4的NLS结构域中两个重要位点Lys-Lys(KK)和Arg-Ala-Arg-Ser-Lys(RARSK)并不改变对ERK1激活的能力,但突变ING4 PHD结构域中RKKK位点则改变了调控ERK1磷酸化的能力.结论 ING4的NLS和PHD指状结构域同时参与了刺激MAPK细胞信号通路成员ERK1的激活.
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