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目的 利用分子生物学技术,构建pCAG-JG双顺反子真核表达质粒,为研制新型的日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)核酸疫苗奠定基础。方法 RT-PCR扩增JEV的prM-E-NS1和小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)后,分别克隆入中间载体pIRES,经酶切获得prM-E-NS1-IRES-GM-CSF片段,并将其插入pCAGGSP7质粒,鉴定阳性重组子。