【摘 要】
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用插入突变的膜结合型ＴＮＦ—α基因的重组逆转录病毒载体转染人胃癌细胞ＭＧＣ，获得膜结合型ＴＮＦ—α基因转染阳性的人胃癌细胞ＭＧＣ８０３（ＭＧＣ８０３Ｔ）。用ＭＴＴ比色法、３Ｈ—ＴｄＲ释放法检测ＭＧＣ８０３Ｔ及未转染的人胃癌细胞ＭＧＣ８０３（ＭＧＣ８０３Ｎ）细胞表面ＴＮＦ—α的
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用插入突变的膜结合型ＴＮＦ—α基因的重组逆转录病毒载体转染人胃癌细胞ＭＧＣ，获得膜结合型ＴＮＦ—α基因转染阳性的人胃癌细胞ＭＧＣ８０３（ＭＧＣ８０３Ｔ）。用ＭＴＴ比色法、３Ｈ—ＴｄＲ释放法检测ＭＧＣ８０３Ｔ及未转染的人胃癌细胞ＭＧＣ８０３（ＭＧＣ８０３Ｎ）细胞表面ＴＮＦ—α的细胞毒效应。结果表明，ＭＧＣ８０３Ｔ对鼠纤维肉瘤细胞Ｌ９２９有杀伤作用，而对照细胞ＭＧＣ８０３Ｎ无杀伤作用，说明逆转录病毒介导的膜结合型ＴＮＦ—α基因在人胃癌细胞获得有效表达。二种方法检测ＭＧＣ８０３Ｔ细胞的细胞毒效应获得良好相关性。与３Ｈ—ＴｄＲ释放法相比，ＭＴＴ比色法具有操作简便，对人体无损伤的优点
A human gastric cancer cell MGC803 (MGC803T) transfected with a membrane-bound TNF-α gene was transfected with a recombinant retrovirus vector inserted into the mutated membrane-bound TNF-α gene. The cytotoxicity of TNF-α on the surface of MGC803T and untransfected human gastric cancer cell MGC803 (MGC803N) was detected by MTT assay and 3H-TdR release assay. The results showed that MGC803T had killing effect on mouse fibrosarcoma cell L929, while control cell MGC803N had no killing effect, indicating that retrovirus-mediated membrane-bound TNF-α gene was effectively expressed in human gastric cancer cells. Two methods to detect the cytotoxic effect of MGC803T cells were well correlated. Compared with the 3H-TdR release method, the MTT colorimetric method has the advantages of easy operation and no damage to the human body.
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