【摘 要】
：
目的 探讨重组梅毒螺旋体蛋白Tp47(rTpp47)对单核-巨噬细胞系THP-1合成尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)的调控及其对人脐静脉/血管内皮细胞(HUVECs)通透性的影响.方法 用rTpp47刺激THP-1细胞24 h后,分别收集细胞培养上清和THP-1细胞,用ELISA和Western blot检测THP-1细胞表达的uPA含量;用THP-1细胞培养上清刺激人单层血管内皮细胞后,使用FITC-葡聚糖评价单层内皮细胞通透性的变化,用Western blot检测uPA对HUVECs细胞紧密连接蛋白c
【机 构】
：
广州医科大学附属第一医院 检验科,广东 广州510120;南方医科大学皮肤病医院 皮肤科,广东 广州510095
论文部分内容阅读
目的 探讨重组梅毒螺旋体蛋白Tp47(rTpp47)对单核-巨噬细胞系THP-1合成尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)的调控及其对人脐静脉/血管内皮细胞(HUVECs)通透性的影响.方法 用rTpp47刺激THP-1细胞24 h后,分别收集细胞培养上清和THP-1细胞,用ELISA和Western blot检测THP-1细胞表达的uPA含量;用THP-1细胞培养上清刺激人单层血管内皮细胞后,使用FITC-葡聚糖评价单层内皮细胞通透性的变化,用Western blot检测uPA对HUVECs细胞紧密连接蛋白claudin-5表达的影响以及PKC信号通路是否参与rTpp47诱导的THP-1细胞表达uPA.结果 重组蛋白rTpp47刺激THP-1细胞合成和分泌的uPA显著高于对照组(P<0.05,P<0.001);用rTpp47与THP-1细胞共培养24 h后收集的细胞培养上清刺激单层血管内皮细胞12和24 h,实验组血管内皮细胞相对通透性显著高于对照组(P<0.05,P<0.0001);uPA活性抑制剂阿米洛利(amiloride)抑制了rTpp47刺激THP-1细胞分泌uPA(P<0.0001),改善了rTpp47对HUVECs的claudin-5蛋白表达的抑制作用(P<0.05),抑制了rTpp47诱导的THP-1细胞表达蛋白激酶C(PKC)的磷酸化(P<0.05).结论 重组蛋白rTpp47可能通过激活PKC信号通路刺激THP-1细胞合成和分泌的uPA,uPA作用于血管内皮细胞,可能导致血管内皮细胞通透性升高.
其他文献
核壳结构树状大分子(core-shell tecto dendrimers,CSTDs)是一类以相对高代树状大分子为核、相对低代树状大分子为壳的超结构树状大分子纳米体系.越来越多的研究表明,利用不同代的聚酰胺-胺[poly(amidoamine),PAMAM]树状大分子作为反应模块构建的CSTDs不仅具有比相对高代树状大分子更优异的理化性能,还克服了单代树状大分子在医学应用上的一些局限性(如有限的载药量和EPR效应等).在此,本文综述了近年来CSTDs的几种制备方法,并分类介绍了基于CSTDs的纳米平台在
目的 蛇菰多糖(BPS)对D-半乳糖(D-gal)所致实验性肝损伤大鼠的肝功能及肝组织内BDNF、TrkB蛋白和凋亡相关蛋白表达的影响.方法 将大鼠随机分为对照组(control),D-gal组(皮下注射D-半乳糖200 mg/kg),BPS低(D-gal+BPS-L)、中(D-gal+BPS-M)、高(D-gal+BPS-H)剂量组,分别每天灌胃50、100和200 mg/kg BPS,共6周.心脏取血检测血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平;HE染色法观察肝组织形态;免疫组织化学染色检测
目的 探讨呋塞米(FUR)对脑出血(ICH)大鼠RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶(PERK)/真核起始因子2α(eIF2α)/转录因子CCAAT增强子结合蛋白的同源蛋白(CHOP)通路及继发性脑损伤的影响.方法 将大鼠分为假手术组、模型组(脑定位注射Ⅳ型胶原酶,建立ICH模型)、FUR低剂量组(FUR-L)、FUR中剂量组(FUR-M)、FUR高剂量组(FUR-H)、神经节苷脂组,每组18只.药物处理后,检测神经功能,对其进行Longa评分;测量大脑含水量;用Evans蓝外渗实验检测血脑屏障损伤;用HE染
目的 观察特异性坏死性凋亡抑制剂-1(Nec-1)对脊髓损伤模型大鼠胶质瘢痕形成的影响及其机制.方法 将大鼠随机分为假手术组、模型组(坠落法)及受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)抑制剂Nec-1组(在大鼠侧脑室注射10μmol/L Nec-110μL).BBB评分法测定大鼠后肢运动功能,免疫荧光检测胶质瘢痕形成,Western blot检测组织蛋白酶(cathepsin)B、caspase-3、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和vimentin表达.结果 术后第14天,与假手术组相比,模型组和Nec-1组B
生殖系统的健康与女性生殖能力和生活质量密切相关.近年来女性生殖系统相关疾病发病率日渐升高并呈现年轻化趋势,对女性生殖健康带来诸多不利影响,亟需发展有效的治疗方法.通过组织工程技术引导组织再生,从而实现器官功能的恢复,为相关疾病的治疗提供了新途径.本文对近年来基于纳米结构和生物材料的组织工程支架构建以及组织工程技术在卵巢早衰、卵泡体外培养、子宫宫腔黏连、子宫缺损修复、盆腔器官脱垂等疾病治疗中的应用研究进行回顾总结和综合评述.
基因治疗是针对基因异常相关疾病的终极治疗技术,各种具有不同机制的核酸药物的出现为基因治疗带来了更多的可能性.但是,由于存在体内稳定性差、难以高效进入靶细胞等问题,核酸药物需要载体的帮助而进入目标细胞并到达特定的胞内位置,因此,开发安全高效的核酸递送系统是基因治疗的基石.与病毒载体相比,非病毒载体具有更高的安全性,但转染效率较低.随着纳米技术的发展,非病毒载体的效率得到了显著的提升,进入临床研究的数量逐渐增多.本文简要介绍基因治疗中的核酸药物及其递送载体,对非病毒核酸药物递送技术的瓶颈及进展做综合评述.
纳米材料具有尺寸小、比表面积高的特点,在光、声、电、热、磁等性质上有着不同于其他传统材料的独特之处.随着纳米材料研究的不断进步,越来越多的功能化纳米材料以及相关器件凭借着高灵敏度、高特异性、准确、快速等优点,在医学检测领域得到了广泛应用.纳米材料的快速发展可以为临床诊断提供新的方法,为疾病的预防以及治疗提供更多的科学依据.纳米材料在多种疾病的诊断上均有着较大的发展潜力和广阔的应用前景.本文概述了纳米材料的特性及其用于医学检测的原理,介绍了纳米材料在传染病、恶性肿瘤、糖尿病、神经退行性疾病和心血管疾病等医学
目的 探究circRNA_23113在肺腺癌中的表达及对肺腺癌细胞增殖和迁移的影响.方法 通过高通量测序技术测序5例临床肺腺癌、癌旁组织标本,筛选出差异性表达的circRNA_23113.实时荧光定量PCR检测肺腺癌组织、血清和细胞中circRNA_23113的表达;构建circRNA_23113的过表达质粒,用CCK-8法、克隆形成实验、细胞划痕和Transwell小室法分析其对细胞增殖和迁移的影响;用Western blot检测β-catenin、cyclin D1以及c-myc蛋白水平的表达.结果
目的 观察Pluronic F-127(PF-127)水凝胶负载编码慢病毒LINGO-1 shRNA(LV)及神经营养因子混合物(NTFs)(PF-127-LV-NTFs)三维复合支架对大鼠神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响.方法 构建慢病毒(LV)后以不同感染复数(MOI)感染NSCs,用RT-qPCR及Western blot检测NSCs中LINGO-1的表达;按照一定比例将脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养素-3(NT-3)、血小板衍生生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)
目的 探究丙泊酚对子宫内膜癌细胞系RL95-2增殖和凋亡的影响,以及对mTOR/S6K1信号通路的作用.方法 将RL95-2细胞分为对照组和丙泊酚组(加入不同浓度的丙泊酚).CCK-8法检测细胞增殖;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞测量术检测细胞凋亡;比色法测定细胞caspase-3和caspase-9活性;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)磷酸化水平.结果 与对照组相比,丙泊酚各组RL9