【摘 要】
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目的:评价生物人工肝用海藻酸钠/壳聚糖微囊（AC微囊）的安全性和预期生物功能。方法:制备AC微囊,通过倒置电子显微镜、扫描电子显微镜（SEM）等对微囊的表面结构、密度、机械强度和
【机 构】
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温州医科大学检验医学院生命科学院; 中国食品药品检定研究院; 西南交通大学材料科学与工程学院材料先进技术教育部重点实验室;
【基金项目】
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“863”课题“干细胞和生物人工肝治疗终末期肝病的转化研究”(SS2013AA020102)
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目的:评价生物人工肝用海藻酸钠/壳聚糖微囊（AC微囊）的安全性和预期生物功能。方法:制备AC微囊,通过倒置电子显微镜、扫描电子显微镜（SEM）等对微囊的表面结构、密度、机械强度和物质通透性等进行综合表征;通过AC微囊的细胞毒性及溶血性能评价,考察其生物相容性;模拟其预期临床使用方式,用AC微囊包裹肝细胞,评价细胞的存活率和代谢活性:进一步考察微囊的预期生物功能。结果:SEM显示微囊表面具有微孔洞;微囊密度为（1.39±0.155）g·m L-1;180 r·min-1振摇24 h后其完整率在95%以上;微囊通透性试验显示10 min时人血清白蛋白释放率约为50%,90 min左右达到平衡状态。细胞毒性评价（MTT、LDH）的结果显示微囊浸提液与空白组相比细胞的相对活性没有显著性差异。血液相容性评价直接法显示溶血率为（1.36±0.211）%;浸提法的溶血率为（2.69±0.219）%,均低于标准限值（≤5%）。包裹的肝细胞均匀分布在微囊内,并且与未包裹的肝细胞相比其白蛋白和尿素合成量均有所提高。结论:本研究制备的AC微囊机械强度好,可允许小分子物质透过。微囊无明显细胞毒性,溶血率低,生物相容性良好;微囊化培养的细胞能够维持并提高肝细胞生存活性和代谢功能。本研究建立的规范性评价技术和试验方法为制定生物人工肝用AC微囊质量控制标准提供了技术支持,并为合理的科学监管提供依据。
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