【摘 要】
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根据发表的鹅细小病毒B株VP3基因序列,设计合成了1对寡聚核苷酸引物.以国内分离的小鹅瘟病毒为摸板,筛选了(PCR)最佳反应条件,并进行了敏感性、特异性和初步应用试验.结果表
【基金项目】
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吉林省科委资助课题:肉绒兼用型鹅产业化生产综合配套技术研究 (990 2 0 5 )
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根据发表的鹅细小病毒B株VP3基因序列,设计合成了1对寡聚核苷酸引物.以国内分离的小鹅瘟病毒为摸板,筛选了(PCR)最佳反应条件,并进行了敏感性、特异性和初步应用试验.结果表明,在40 μL体积中,PCR最佳系统组成为2 u Taq酶、0.5 mol/L dNTP和20 pmol引物;最佳反应参数为96℃变性40 s,54℃退火1 min,72℃延伸1 min,30个循环.本方法可检出2.5×10-1.5EID50小鹅瘟病毒,并且仅能从小鹅瘟病毒的鹅胚培养物中扩增出与设计值大小相同的375 bp
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