【摘 要】
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目的 研究制备抗玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)单克隆抗体免疫亲和柱(IAC).方法 用辛酸硫酸铵法纯化抗ZEN单克隆抗体,将纯化好的单抗与溴化氰活化的4FF葡聚糖偶联制备抗ZEN单克隆抗体免疫亲合柱.采用紫外扫描鉴定偶联反应,间接竞争酶联免疫吸附法及高效液相色谱法(HPLC)对制备好的免疫亲合柱进行评价.结果 每根抗ZEN单克隆抗体免疫亲和柱,使用0.5 ml溴化氰活化的4FF葡聚
【机 构】
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330006,南昌市疾病预防控制中心,330047,南昌大学中德联合研究院,教育部食品科学国家重点实验室,330047,南昌大学中德联合研究院,教育部食品科学国家重点实验室,330047,南昌大学中德
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目的 研究制备抗玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)单克隆抗体免疫亲和柱(IAC).方法 用辛酸硫酸铵法纯化抗ZEN单克隆抗体,将纯化好的单抗与溴化氰活化的4FF葡聚糖偶联制备抗ZEN单克隆抗体免疫亲合柱.采用紫外扫描鉴定偶联反应,间接竞争酶联免疫吸附法及高效液相色谱法(HPLC)对制备好的免疫亲合柱进行评价.结果 每根抗ZEN单克隆抗体免疫亲和柱,使用0.5 ml溴化氰活化的4FF葡聚糖,350 μg ZEN单克隆抗体,柱容量为0.40 μg.小麦样品添加ZEN标品60～300μg/kg,回收率76.33%～90.10%,相对标准偏差6.68%～10.93%.使用本实验室制备的抗ZEN单克隆抗体免疫亲合柱建立了IAC-HPLC方法,并检测小麦、玉米、饲料样品30份,结果有17份样品为阳性,阳性率56.67%,样品中ZEN含量为31.33～377.84 μg/kg;信噪比为3∶1时,检测下限为10.00 μg/kg.结论 抗ZEN单克隆抗体免疫亲和柱能快速特异地将ZEN从样品中分离出来,并同时完成净化和浓缩步骤,是一种简便的净化方法。
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