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目的
研究缺氧缺血对妊娠中期人类胚胎脑室管膜下区(subventricular zone, SVZ)神经细胞亚群的影响。
方法取即刻解离的妊娠中期人类胚胎脑SVZ细胞,分缺氧缺血组(HI组)和对照组短时培养。以氧糖缺失法(OGD)制备缺氧缺血损伤细胞模型。培养前以细胞成活率评价损伤程度,培养后以细胞特异性标志蛋白nestin、MAP2、GFAP、PDGFRα及RCA120的抗体通过免疫荧光细胞化学法分别鉴定神经干细胞(NSCs)、神经元、星形胶质细胞、少突胶质祖细胞及小胶质细胞,比较其百分含量。
结果HI组的细胞成活率(63.41%±0.06%),明显低于正常组(98.9%±0.01%)(P<0.001),短时培养后HI组中细胞亚群中含量最高的是GFAP(+)的星形胶质细胞56.48%±0.03%,其次为神经干细胞NSCs 22.47%±0.03%而PDGFRα(+)的少突胶质祖细胞含量最低;在对照组中最高则为MAP2 (+)的神经元48.81%±0.03%,其次为GFAP(+)的星形胶质细胞32.31%±0.03%,含量最少的为小胶质细胞1.15%±0.01%。
结论妊娠中期人类胚胎脑SVZ含有NSCs、神经元、星形胶质细胞、少突胶质祖细胞和小胶质细胞,缺氧缺血对SVZ神经细胞损伤明显,不同细胞对缺氧缺血损伤的耐受性不同:NSCs、星形胶质细胞对缺氧缺血损伤的耐受性相对强于神经元、少突胶质祖细胞。