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我们采用Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ的方法，成功地从Ｒａｊｉ细胞中扩增出Ｂ７ ｃＤＮＡ，通过单个碱基改变，在两端分别引入单酶切位点（５＇端为ＨｉｎｄⅢ，３＇端为ＥｃｏＲⅠ），经酶切后连入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ克隆载体，测序证明所得序列与Ｆｒｅｅｍａｎ等报告的完全一致。我们所选用的两个酶切位点ＨｉｎｄⅢ和ＥｃｏｒＩ恰好位于ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ多克隆位点的中央，克隆入Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ后，两端有多个单酶切