【摘 要】
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目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测病毒核酸的方法学性能验证程序。方法参考美国国家临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的相关文件对实验室开展PCR检测病毒核酸进行方
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目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测病毒核酸的方法学性能验证程序。方法参考美国国家临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的相关文件对实验室开展PCR检测病毒核酸进行方法学性能验证;通过稀释标本直至低于检测下限进行定量检出限验证实验。结果乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)检测的批内精密度(CV批内)分别为4.28%和2.08%;总精密度(CV总)为4.14%和2.69%;与比对方法回归方程为y=1.1082x-0.5225;线性相关系数为0.9976,回归方程为y=0.9771x-0.0062,线性范围为1.08E3~1.05E8;定量检出限为500IU/mL。丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)检测的CV批内分别为4.11%和2.63%;CV总为5.15%和3.41%;与比对方法回归方程为y=1.0075x-0.0662;线性相关系数为0.9974,回归方程为y=1.0479x-0.2594,线性范围为1.50E3~2.53E7;定量检出限为1000IU/mL。结论实验室开展PCR检测项目前有必要进行方法学验证,根据实际情况选择实验方案和统计方法可减少人力和财力。
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