大鼠bcl-xL cDNA的克隆和高滴度重组bcl-x L/腺相关病毒的制备

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zym_Java
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
以RT-PCR法从大鼠脑组织中克隆bcl-XL基因,将其定向插入带rep-cap基因和neu基因的三功能腺相关病毒(AAV)载体,转染HeLa细胞并以G418筛选,然后用腺病毒感染筛选后的细胞克隆,包装成重组腺相关病毒.用带rep-cap基因的C12细胞筛选和滴定产生重组腺相关病毒的细胞克隆,粗制细胞裂解物中病毒滴度最高只有3×105IU/ml.从产病毒量较高的克隆大量制备重组病毒,经肝素柱高压液相亲和层析法纯化、浓缩病毒后获得了高达4×1011IU/ml的重组病毒.为研究脑缺血动物模型中BCL-XL的抗脑细胞凋亡作用打下了基础.
其他文献
以典型的热带、亚热带、温带和高原玉米种质为材料,采用人工延长光照的方法,观测了各类种质对长光周期的反应.结果表明,随光周期由13.3 h延长至17.5 h,不同生态型玉米种质表
研究川西岷江上游亚高山针叶林区不同年龄阶段的人工云杉林地凋落物及其养分贮量和土壤养分及主要理化性质的变化趋势 ,结果表明 :(1)人工云杉林的凋落物及其氮、磷、钾贮量
目的进一步探索日本血吸虫病经胎盘传播的免疫耐受性.方法对不同孕期的怀孕母兔分别感染300条日本血吸虫尾蚴,感染45天后收集母兔和仔兔血清84份,在检测家兔日本血吸虫特异性
临床资料患者,女,45岁.主因右腋下红斑、丘疱疹、瘙痒反复发作20余年,加重2个月,于2010年6月24日至我院皮肤科就诊.患者自1988年开始右腋下出现红斑、丘疹、疱疹、渗出、结痂
1例20岁男性患者因骨肉瘤给予2个周期大剂量甲氨蝶呤化疗(8 g/m2)。第2次化疗后第7天,患者突然出现言语不畅、左手麻木、恶心、乏力,后逐渐进展为失语、双上肢强直、双下肢麻
目的 探讨儿童眼部疾患和频繁瞬目的可能原因.方法 对215例患儿详细询问病史及不良生活习惯等,检查视力、眼睑、结膜、角膜、眼底、屈光状态,并12岁以下均行阿托品眼膏散瞳验
目的 观察乏氧环境下PTEN和KAI1基因双转染人胰腺癌AsPC1细胞后对其增殖、迁移的影响.方法 应用我们前期构建的PTEN和KAI1基因过表达载体同时转染乏氧环境培养的人胰腺癌AsPC
研究平阳霉素对烟草的诱变效应,结果表明:平阳霉素对烟草品种NC89的苗高、发芽率、成苗率、根长、叶绿素含量等有显著影响.半致死条件为20 μg/mL,16 h.平阳霉素是一种对烟草
在大豆盛花期和结荚期,土壤水稳性团聚体数量达到最大值,比苗期增加30%.玉米区土壤在同一时期水稳性团聚体也达到最大值,比苗期增加23%.但在收获期,大豆区水稳性团聚体比苗期
目的建立人卵巢卵泡分离提取的方法。方法尝试机械吹打、胶原酶消化、镜下显微解剖及胶原酶消化加镜下显微解剖4种卵泡提取方式并相互对比。观察不同年龄阶段卵巢的卵泡数量