神经营养因子-3对骨髓间充质干细胞增殖凋亡的影响及机制

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探讨神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖及凋亡的影响及可能机制。

方法

将NT-3过表达及干扰慢病毒转染的BMSCs细胞与神经元细胞共培养,分为过表达对照组、NT-3转染组、抑制对照转染组、shRNA-NT-3转染组(NT-3沉默组)4组,MTT检测共培养24 h、48 h、72 h细胞增殖情况;流式细胞术检测48 h细胞周期变化及凋亡情况;实时荧光定量PCR检测C/EBPβ mRNA表达情况;Western blot检测C/EBPβ蛋白表达情况。

结果

MTT结果显示,与过表达对照组比较,48 h及72 h时间点NT-3转染组BMSCs细胞增殖能力(0.650±0.042,0.826±0.074)显著增强(P<0.05),与抑制对照转染组比较,48 h及72 h时间点NT-3沉默组BMSCs细胞增殖能力(0.426±0.062,0.516±0.088)显著降低(P<0.05);流式细胞术检测48 h细胞周期及凋亡结果显示,NT-3转染组BMSCs细胞G1期比例降低,G2及S期升高,凋亡减少;NT-3沉默组BMSCs细胞G1期比例升高,G2及S期降低,凋亡增加;荧光定量PCR及Western blot结果表明C/EBPβ mRNA及蛋白水平在NT-3转染组BMSCs细胞中显著上调,而在NT-3沉默组BMSCs细胞中显著降低(P<0.05)。

结论

NT-3可能通过促进C/EBPβ表达影响其下游相关靶基因的表达,从而抑制BMSCs细胞增殖分化过程中的细胞凋亡。

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