极端耐热纤维素酶Cel74的表达、纯化与特性

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从海栖热袍菌中克隆出编码热稳定性的纤维素酶基因,以热激载体pHsh为表达质粒,构建重组质粒phsh—Ceff4,并转化至大肠杆菌中进行表达。基因表达产物通过热处理和离子交换层析,重组酶纯度达电泳纯。对纯化的重组酶酶学性质研究表明,最适反应温度85℃,最适反应pH4.6,pH4.5—6.0之间酶的相对酶活在80%以上。Co^2+对酶活性有促进作用,Ca^2+、Mg^2+、Zn^2+不影响酶活性,而Cu^2+、Ni^2+、Mn^2+对酶活性有抑制作用。
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