【摘 要】
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以大肠杆菌碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AP）高活性突变株（L138PG233S）为亲本,采用重叠延伸PCR的方法进行定点突变,成功获得了氨基酸替换突变体3个,并对它们的酶活性、特性、
【机 构】
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北京师范大学生命科学学院,河北旅游职业学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30370333);国家基础科学人才培养基金资助项目
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以大肠杆菌碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AP）高活性突变株（L138PG233S）为亲本,采用重叠延伸PCR的方法进行定点突变,成功获得了氨基酸替换突变体3个,并对它们的酶活性、特性、内源荧光发射峰等与亲本酶进行了比较分析.结果发现：与亲本酶相比,突变体酶的酶活性降低了18%-85%,Vmax值降低,Km增加,内源荧光发射峰λmax增大等.与亲本酶相同,Zn^2＋,Mn^2＋,Mg^2＋仍是它们的激活剂,Na3PO4是它们的抑制剂;这些实验结果说明突变体酶活性的降低直接与其构象变化
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