【摘 要】
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目的:获得鼠抗人精浆蛋白(γ-Sm)单抗可变区基因,为单链抗体的构建及表达奠定基础.方法:从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体(γ-Sm-McAb)的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA,经反转录、PCR分离获
【基金项目】
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全军重点实验室基金!1997-71-22
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目的:获得鼠抗人精浆蛋白(γ-Sm)单抗可变区基因,为单链抗体的构建及表达奠定基础.方法:从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体(γ-Sm-McAb)的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA,经反转录、PCR分离获得了γ-Sm-McAb轻链可变区(VL)基因和重链可变区(VH)基因,分别克隆人pUC19质粒中,用全自动荧光DNA序列分析仪对VH,VL基因序列进行了分析.结果:E4B7VH基因由358bp组成,编码119个氨基酸,E4B7VL基因由326bp组成,编码108个氨基酸;从推导出的氨基酸序列分析证实E4B7VH,VL序列均符合小鼠Ig可变区的氨基酸序列特征.结论:所克隆基因与Internet中基因文库的所有已知基因比较,未查到相同基因,与小鼠免疫球蛋白可变区基因同源性最高.
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