【摘 要】
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目的探讨人α干扰素(IFN-α)基因转化双歧杆菌口服后对小鼠免疫功能的调节作用。方法构建含人IFN-α基因的大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达载体p BADX-h IFNα2b,电转化获得IFN-α
【机 构】
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南方医科大学基础医学院细胞生物教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金(81373315);广东省科技攻关项目(2010B011000005)~~
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目的探讨人α干扰素(IFN-α)基因转化双歧杆菌口服后对小鼠免疫功能的调节作用。方法构建含人IFN-α基因的大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达载体p BADX-h IFNα2b,电转化获得IFN-α基因转化双歧杆菌,收集L-阿拉伯糖诱导h IFN-α2b表达后的菌体制备成活菌悬液,灌胃Balb/C小鼠。实验组(IFN)小鼠用0.2%L-阿拉伯糖诱导表达后的h IFN-α2b转化双歧杆菌处理,每只按0.1 ml 1010/ml活菌灌胃;阴性对照组(NC)用等量等体积空载体p BADX转化双歧杆菌活菌灌胃;空白对照组(BC)用等体积生理盐水灌胃。隔天灌胃1次,连续处理2周。流式细胞术检测小鼠胸腺、脾脏和血液中淋巴细胞亚群和比例,流式试剂盒检测IFN-γ、IL-4等免疫因子的含量。结果与NS组和BC组相比,IFN组小鼠胸腺CD3+CD8+、CD4+CD8+细胞的比例显著升高(P<0.01);脾脏CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD4+CD8+细胞的比例均显著升高(P<0.01);血液中只有CD3+CD8+细胞的比例显著升高(P<0.01)。血液中IFN组IFN-γ的含量比BC组和NS组显著升高(P<0.01);此外,NS组IFN-γ的含量比BC组显著升高(P<0.05);3组小鼠中血液h IFN-α2b和IL-4的浓度无显著性差异(P>0.05)。结论口服h IFN-α转化的双歧杆菌促进小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞增殖和成熟,增高血液Th1类细胞因子水平。
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