【摘 要】
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本研究通过对蓝舌病病毒1型(BTV1)的NS1基因进行抗原性分析,选取其中抗原指数较高的片段(1~960 bp),利用RT-PCR扩增获得NS1截短基因序列,插入原核表达载体pET-30a中构建重组
【机 构】
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中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
【基金项目】
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国家自然科学基金(31672562),国家重点研发计划(2017YFD0502304)。
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本研究通过对蓝舌病病毒1型(BTV1)的NS1基因进行抗原性分析,选取其中抗原指数较高的片段(1~960 bp),利用RT-PCR扩增获得NS1截短基因序列,插入原核表达载体pET-30a中构建重组表达质粒pET-NS1-320aa,将该重组质粒转入大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达并进行可溶性分析,利用SDS-PAGE对截短NS1蛋白的表达进行检测,发现重组NS1蛋白主要以包涵体的形式存在于菌体中。利用组氨酸标签纯化树脂获得了高纯度的NS1蛋白;将其免疫新西兰大白兔制备的抗NS1多克隆抗体不
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