布氏杆菌抗原蛋白pbp39基因重组穿梭质粒的构建与鉴定

• 作 者: 钟蓓 杨玉莹 张西臣 顾玉芳 陈振威 多婷
• 机 构: 长江大学动物科学学院,吉林大学畜牧兽医学院
• 出 处: 长江大学学报(自然科学版)
• 发表日期: 2011年03期
• 关键词: 布氏杆菌(Brucella abortus) pbp39 p276 穿梭质粒

为构建融合表达PBP39-P276的E.coli-分枝杆菌穿梭载体,分别以布氏杆菌(Brucella abortus)基因组DNA和PMD 18-T-p276质粒为模板,通过PCR扩增得到约1206bp的pbp39抗原基因和276bp的p276基因序列,将pbp39基因与穿梭表达质粒pMV361重组,得到重组质粒pMV361-pbp39,再将p276基因序列克隆至pMV361-pbp39中,得到重组质粒pMV361-pbp39-p276。质粒pMV361-pbp39-p276经PCR扩增鉴定证实,克隆基因pbp39和抗原基因p276正确插入载体pMV361。重组质粒pMV361-pbp39-p276可望在卡介苗(BCG)中分泌性表达布氏杆菌的免疫保护性抗原蛋白PBP39-P276,该质粒的构建成功为发展新型布氏杆菌疫苗奠定了基础。