幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白的基因克隆与表达

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目的克隆、表达幽门螺杆菌中性粒细胞激活蛋白基因napA,为研究幽门螺杆菌致病机理提供材料。方法用PCR从幽门螺杆菌DNA中扩增出目的基因rapA,定向插入原核表达载体pQV30中,测序分析确认后,转化大肠杆菌DH5a,踟诱导表达,表达蛋白以NI^2+NTA柱进行纯化。结果PCR扩增出435bp目的基因片段napA,克隆入pQE30质粒。工程菌诱导后SDS-PAGE显示新生表达蛋白带,相对分子质量为17000,与预期一致,约占菌体总蛋白的38%,经Ni^2+-NrA柱纯化后可获得纯度为95.5%重组蛋白。W
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