【摘 要】
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[目的]本试验旨在建立肌肉生成抑制素基因(myostatin,MSTN)敲除猪的快速检测方法,为该品系转基因猪及其产品的检测提供技术支持.[方-法]根据猪β2-微球蛋白基因(β2-microglo
【机 构】
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中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所,北京,100029;山东出入境检验检疫局,山东 青岛,266002;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100094
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[目的]本试验旨在建立肌肉生成抑制素基因(myostatin,MSTN)敲除猪的快速检测方法,为该品系转基因猪及其产品的检测提供技术支持.[方-法]根据猪β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,B2M)设计猪内源性基因引物,标记基因新霉素磷酸转移酶基因(neomycin phosphotransferaseⅡ,NPT口)和测定的边界序列设计特异性引物,对引物的量进行调整,优化反应条件.对PCR的敏感性和特异性进行检测,并应用建立的方法对随机选取的32份猪肺和脾脏组织样品进行检测,均仅扩增出B2M条带.[结果]该方法的最佳退火温度为56℃,最低能检测出含1％ MSTN基因敲除基因组成分的样本,对32份组织样本仅扩增出B2M条带.[结论]建立的多重PCR方法敏感、特异,在一个反应中能检测多个基因片段,可用于MSTN基因敲除猪的检测,为此品系转基因动物检测标准的建立提供依据.
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