不同供体细胞及其处理对猪核移植重构胚体外发育的影响

• 作 者: 张德福 刘东 汤琳琳 王英 陈茵 王凯 王根林 KARL S
• 机 构: 南京农业大学动物科技学院,上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海市农业遗传育种重点实验室,上海第二医科大学、上海市发育生物学重点实验室,AnimalBreedingInstitute
• 出 处: 遗传
• 发表日期: 2007年2期
• 关键词: 猪 体细胞核移植 细胞周期 pigs somatic cells nuclear transfer cell cycle
• 基金项目: 德国BMBF（编号No：CHN99/310）基金、上海市科学技术委员会（编号：014909005,04DZ05611）和上海市科技兴农重点攻关项目（沪农科攻字（2005）第14-1号）资助

系统探讨了体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响。体外成熟培养40～44h的猪卵母细胞去核后，将经血清饥饿（0．5％FBS）培养2～9天、0．1mg／L Aphidicolin（APD）培养＋0．5％FBS培养2～9天或一般培养法（10％FBS）培养的卵丘细胞、颗粒细胞、输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞，直接注射到去核的卵母细胞质中，或注射到卵周隙中，再经电融合（100V／mm，30μs，电脉冲1次）构建重构胚．重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6．DMAP激活处理，体外培养6天。耳皮