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本实验取5例小儿先天性巨结肠病手术标本,含近端结肠(扩张段)及远端结肠(狭窄段),2例非本病的“正常”对照直肠标本,然后以4%多聚甲醛-0.2%戊二醛-0.2%苦味酸液冰箱内固定3天,振动切片40μm,按我室改良的PAP法显示SP免疫反应性。SP抗体(1:8000)4℃冰箱内孵育7天,羊抗兔IgG(11200)、PAP(11400),25℃各2h,DAB显色后入1%锇酸冷固定1h,常规电镜脱水,平板包埋,聚合后取肌间神经丛部位超薄切片,电镜观察。