青蟹双顺反子病毒-1原位杂交检测方法的建立与应用

• 作 者: 崔亚婷 倪军 马红玲 许海东 冯娟 申亚阳 郭志勋
• 机 构: 中国水产科学研究院南海水产研究所/农业部水产品加工重点实验室,上海海洋大学水产与生命学院,广东省水生动物疫病预防控制中心
• 出 处: 广东农业科学
• 发表日期: 2015年11期
• 关键词: 拟穴青蟹 青蟹双顺反子病毒-1 地高辛核酸探针 原位杂交 Scylla paramamosain mud crab dicistrovirus-1 dig-
• 基金项目: 广东省省级财政鱼病防治专项资金（2013）,广东省科技计划项目（2011A020102002）,中国水产科学研究院基本科研业务费专项（2012TS06）

根据青蟹双顺反子病毒-1 （mud crab dicistrovirus-1,MCDV-1）基因的保守序列设计1对引物,从感染MCDV-1的青蟹鳃组织中提取RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到1 314 bp的cDNA片段.纯化后的PCR产物用地高辛（DIG）标记制备核酸探针,此探针与青蟹呼肠孤病毒（MCRV）、鲍肌肉萎缩症病毒（AbSV）、类疱疹病毒（AbHV）、白斑综合症病毒（WSSV）、虎纹蛙病毒（TFV）、锦鲤疱疹病毒（KHV）等水生动物常见病毒均无交叉反应,可以特异性的检测出MCDV-1,检出