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目的：分离和确证孕烯醇酮中所含杂质的结构。方法：采用柱色谱和制备高效液相色谱法进行分离纯化，MS和NMR等光谱方法确证结构，并合成杂质A后进一步确证其结构。结果：从孕烯醇酮中分离出4个杂质，其中杂质A得到结构确证，其它3个有待确证。合成产物的HPLC、NMR等分析结果与该杂质一致。结论：所得杂质A的结构为：3B，20（R）-二羟基-孕甾-5-烯。