【摘 要】
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目的构建白介素1受体Ⅰ型细胞外基因（可溶性白介素1受体Ⅰ型,sIL-1RⅠ）的pPICZαA-sIL-1RⅠ重组表达载体,利用毕赤酵母表达技术表达sIL-1RⅠ蛋白。方法采用RT-PCR技术扩增基因s
【机 构】
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广州中医药大学DME中心,广州中医药大学第二临床医学院
【基金项目】
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基金项目：广东省科技计划项目（83027）
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目的构建白介素1受体Ⅰ型细胞外基因（可溶性白介素1受体Ⅰ型,sIL-1RⅠ）的pPICZαA-sIL-1RⅠ重组表达载体,利用毕赤酵母表达技术表达sIL-1RⅠ蛋白。方法采用RT-PCR技术扩增基因sIL-1RⅠ,经酶切连接构建重组质粒pPICZαA-sIL-1RⅠ,转化E.coliStb13;阳性克隆经测序成功后,把pPICZαA-sIL-1RⅠ重组质粒电转入毕赤酵母菌株GS115,PCR对阳性克隆进行鉴定,以及对GS115转化子表型筛选。确定表型后,对重组菌株进行甲醇诱导蛋白表达。提取菌体蛋白和上清液
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