血管平滑肌细胞传代培养对内皮祖细胞吞噬Ac-LDL能力的影响及意义

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目的 建立细胞共培养体系,探讨共培养的传代血管平滑肌细胞(SMCs)对内皮祖细胞(EPCs)吞噬Ac-低密度脂蛋白(Ac-LDL)能力的影响及意义.方法 应用含15%FBS、细胞生长因子100 μg/ml的DMEM/F12培养基培养EPCs,组织块法培养SMCs,分别应用Dil标记乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)与FITC标记荆豆凝集素Ⅰ(FITC-UEA-Ⅰ)荧光双染以及α-SM-actin 免疫荧光,对EPCs和SMCs进行鉴定.以单纯EPCs作为对照,分别将第1、4、8及第16代SMCs与EPCs进行非接触或混合共培养,荧光显微镜观察EPCs吞噬Dil-Ac-LDL能力,激光共聚焦显微镜拍照并使用ImageJ1.48u图像分析软件进行细胞荧光强度分析.结果 在非接触性共培养系统,与对照相比,第1、4、8代SMCs对EPCs吞噬Ac-LDL无明显影响,但是第16代SMCs却显著抑制其吞噬能力;在混合共培养系统,第1、16代SMCs均显著抑制EPCs吞噬Ac-LDL(分别为P<0.05与P< 0.01).结论 EPCs吞噬Ac-LDL受SMCs传代培养以及接触方式的影响,合成型SMCs显著抑制EPCs吞噬Ac-LDL,提示应用EPCs移植治疗损伤血管可能存在“时机窗”,血管损伤后极早或过晚应用EPCs移植均可能达不到修复血管损伤的最佳治疗效果.
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