长链非编码RNA RP11-38P22对非小细胞肺癌生长和转移的作用及其机制

• 作 者: 王健 文玉欣 丁培堃 任康奇
• 机 构: 深圳市人民医院(暨南大学第二临床医学院)胸外科 518020,深圳市人民医院(暨南大学第二临床医学院)胸外科 518020,深圳市人民医院(暨南大学第二临床医学院)胸外科 518020,深圳市人民医院
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2020年37期
• 关键词: RP11-38P22 p53 非小细胞肺癌 生长 转移

目的

观察长链非编码RNA RP11-38P22在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中表达水平的变化、对细胞生长和转移的影响以及调控的途径，探讨RP11-38P22在NSCLC的作用机制。

方法

2019年1月至2019年6月深圳市人民医院胸外科获取56对成对的NSCLC组织和相邻癌旁组织。通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测RP11-38P22在56例肺癌组织以及多个肺癌细胞株中的表达变化，并分析其表达水平的变化与NSCLC临床病理特征的相关性。将RP11-38P22过表达和敲低表达的A549和H1299细胞均设为实验组，将转染空载体病毒(即未干扰RP11-38P22表达的)的A549和H1299细胞设为对照组。改变RP11-38P22在细胞株A549和H1299的表达，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验评估RP11-38P22对细胞生长的影响。通过流式细胞术、划痕实验及Transwell实验评估RP11-38P22对细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。此外，通过免疫印迹技术探讨RP11-38P22发挥作用是否与p53通路相关。采用t检验比较两组的平均值，两组以上比较使用方差分析，使用Kaplan-Meier分析和对数秩检验比较生存数据。

结果

与癌旁组织相比较，RP11-38P22在肺癌组织中的表达明显降低(正常组织比腺癌组织为t＝2.266，P<0.05；正常组织比鳞癌组织为t＝2.313，P<0.05)，且其表达的高低与肿瘤大小显著相关(χ²＝4.758，P<0.05)。与正常细胞(HBE)相比，5种NSCLC细胞系中，RP11-38P22表达也显著性下降，差异有统计学意义(A549细胞为F＝45.674，P<0.01；H1299细胞为F＝38.568，P<0.01；PC9细胞为F＝23.337，P<0.05；H460细胞为F＝18.459，P<0.05；Calu3细胞为F＝22.102，P<0.05)。RP11-38P22过表达能够显著抑制A549和H1299细胞系的增殖能力[72 h A549细胞增殖率为对照组(110.275±5.663)%，实验组(65.735±3.706)%，F＝16.342，P<0.05；72 h H1299细胞增殖率为对照组(125.357±6.733)%，实验组(76.857±3.935)%，F＝11.360，P<0.05]，并促进细胞的凋亡[A549细胞凋亡率为对照组(2.031±0.032)%，实验组(35.078±2.512)%，F＝50.231，P<0.01；H1299细胞凋亡率为对照组(1.872±0.022)%，实验组(31.265±1.206)%，F＝41.232，P<0.01]。RP11-38P22敲低表达可增加A549和H1299细胞的迁移[A549细胞划痕面积为对照组(571.235±17.006) μm²，实验组(705.150±32.238) μm²，F＝19.258，P<0.05；H1299细胞划痕面积为对照组(430.786±12.135) μm²，实验组(681.547±30.246) μm²，F＝16.345，P<0.05]和A549细胞侵袭能力(对照组231.235±7.206，实验组345.121±16.201，F＝11.331，P<0.05)；而过表达使得A549细胞的迁移[A549细胞划痕面积为对照组(572.585±19.125) μm²，实验组(278.870±12.215) μm²，F＝15.873，P<0.05]和侵袭能力显著降低，差异有统计学意义[对照组226.772±10.268，实验组125.323±5.819，F＝14.548，P<0.05]。此外，在RP11-38P22敲低表达的细胞中p53的表达显著降低，差异有统计学意义(对照组1.000±0.056，实验组0.377±0.036，t＝3.209，P<0.05)。

结论

长链非编码RNA RP11-38P22通过调控p53途径影响NSCLC细胞的生长和转移。