食源性动物组织中CSFV和PRRSV双重双色荧光定量RT—PCR检测方法的建立及应用

• 作 者: 魏文康 吕殿红 温肖会 罗胜军 黄忠 周秀蓉 贾春玲 袁洁
• 机 构: 广东省农业科学院兽医研究所广东省兽医公共卫生实验室
• 出 处: 中国预防兽医学报
• 发表日期: 2011年8期
• 关键词: 食源性动物组织 猪瘟病毒 猪蓝耳病病毒 双重双色荧光定量PCR food-oriented animal tissues classical swine fe
• 基金项目: 广东省科技计划项目农业攻关（20098020307007）,广州市科技计划项目重大科技专项（2009A1-E041-1）,广东省科技计划项目促进服务业发展专项计划（2010A040207006）

为建立同时检检测食源性动物组织中猪瘟病毒（CSFV）和猪蓝耳病病毒（PRRSV）的双色荧光定量RT-PCR方法。本研究根据SCFV和PRRSV基因序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针，通过优化反应的体系和扩增条件，建立了能够检测食源性动物组织中SCFV和PRRSV的双重双色荧光定量PCR的方法。其检测下限为1×10^2拷贝／μL，而且与其他一些猪病病毒无交叉反应，具有良好的特异性。该方法重复性和稳定性试验表明其组内和组间的变异系数最高分别为4．2和4．5。对比试验表明，该方法