重度子痫前期患者血清对人脐静脉血管内皮细胞的氧化性损伤研究

• 作 者: 钱中清｜李新萍｜王才智｜何小燕｜方芳
• 机 构: 233003 蚌埠医学院免疫学教研室｜蚌埠市第二人民医院产科｜第一附属医院产科｜233003 蚌埠医学院免疫学教研室｜233003蚌埠医学院免疫学教研室
• 出 处: 中华妇产科杂志
• 发表日期: 2013年48期
• 关键词: 先兆子痫 脐静脉 内皮细胞 活性氧 钙 膜电位 线粒体

目的

探讨重度子痫前期患者血清对人脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC) 造成的氧化性损伤。

方法

(1) HUVEC进行如下分组处理:20%健康孕妇血清刺激 (正常血清组) 、20%重度子痫前期患者血清刺激 (PE组) 、20%重度子痫前期患者血清+ 3×10³U/ml过氧化氢酶共同刺激 (PE+ Cat组),并设置空白对照组,继续培养后,透射电镜观察细胞损伤情况,并用流式细胞仪检测凋亡相关蛋白APO2.7的表达情况。 (2) 激光共聚焦显微镜下,对HUVEC进行实时扫描的同时给予如下分组处理:正常血清组、PE组、PE+ Cat组、加入100μmol/L H ₂O ₂ (阳性对照组),分别检测胞内活性氧簇 (ROS) 、Ca²⁺及线粒体膜电位水平。

结果

(1) 透射电镜下,PE组HUVEC的损伤明显,出现细胞膜脱落,并包裹细胞质形成自噬体,线粒体水肿,核固缩;但PE+ Cat组的HUVEC虽然线粒体有轻度水肿表现,但嵴清晰可见,细胞核形态基本正常,细胞损伤明显改善。PE组的HUVEC中APO2.7的表达率为 (37.8±1.1) %,与空白对照组[ (13.4±1.1) %]、正常血清组[ (13.5±1.5) %]比较显著升高,差异均有统计学意义 (P<0.01) ;而PE+ Cat组APO2.7表达率为 (19.2±1.6) %,显著降低,与PE组比较,差异有统计学意义 (P<0.01) 。 (2) 激光共聚焦显微镜下PE组的HUVEC胞内ROS、Ca²⁺荧光强度变化幅度分别为12.0±1.3、4.1±0.7,而正常血清组分别为1.1±0.4、0.6±0.4,PE+ Cat组分别为1.5±0.5、0.9±0.5,PE组分别与正常血清组、PE+ Cat组比较,差异均有统计学意义 (P<0.01) 。PE组的HUVEC线粒体膜电位荧光强度在扫描120 s时有显著降低,而正常血清组、PE+ Cat组变化不明显。

结论

重度子痫前期患者血清通过促进ROS生成,增强Ca²⁺超载水平和降低线粒体膜电位对血管内皮细胞造成氧化性损伤。