HTK液冷保存大鼠后肾原基同种和异种移植研究

• 作 者: 徐剑 孙亚辉 李仲洋 黄业宁 徐春岳 洪良杰 万云乐
• 机 构: 海南医学院第二附属医院肝胆肝移植外科，海口 570311,海南医学院第二附属医院肝胆肝移植外科，海口 570311,海南医学院第二附属医院肝胆肝移植外科，海口 570311,海南医学院第二附属医院肝胆
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2019年36期
• 关键词: 后肾原基 同系移植 异种移植 保存液 器官形成

目的

比较Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate (HTK)与Uinversity of Wisconsin Solution(UW)液冷保存大鼠后肾原基同系和异种裸小鼠移植的效果，探索器官保存液评价新模型。

方法

从受孕第16天(E16)近交系Lewis(RTl1)大鼠提取后肾原基，以0～4 ℃ HTK或UW液保存24、48、72、96 h，植入Lewis鼠(Lewis→Lewis)和BALB/c裸小鼠(Lewis→BALB/c)网膜。体外比较原基乳酸脱氢酶(LDH)释放率(%)和三磷酸腺苷(ATP)存量(%)；在体观察发育后肾结构，比较后肾移植成活率和移植后肾菊粉清除率。实验所得数据以均值±标准差(Mean±SD)表示，率的比较采用χ²检验，两独立样本比较采用t检验，其他参数作方差分析。

结果

HTK冷保存24、48、72、96 h，原基LDH释放率分别为(6.5±1.1)%、(8.6±0.9)%、(11.3±1.3)%、(12.5±0.8)%，逐渐升高，各时段均较UW液组为低，差异无统计学意义(F＝0.752，P>0.05)；ATP存量为(71.8±4.6)%、(53.7±4.8)%、(35.8±3.4)%、(11.1±1.7)%，逐渐降低，尤以96 h明显，在72 h较UW液组低(t＝－2.725，P<0.05)，其余时段相当(F＝0.812，P>0.05)。经HTK液保存3 d，E16后肾原基体积和结构无明显变化，在同种(Lewis→Lewis)或异种(Lewis→BALB/c)网膜中都发育良好，病理和电镜检查正常；HTK液保存24、48、72、96 h的受体Lewis鼠和裸小鼠后肾移植成活率分别为100.0%、100.0%、73.3%、0%(χ²＝1.553，P>0.05)和100.0%、100.0%、80.0%、0%(χ²＝0.653，P>0.05)；保存72 h Lewis鼠移植后肾菊粉清除率(32.10±5.09) μl/(min·g)，与UW液差异无统计学意义(t＝－0.264，P>0.05)。

结论

大鼠E16后肾原基以HTK液保存3 d，可以在同种和异种受体网膜内生长发育，形成器官并发挥功能。后肾原基同系或异种裸小鼠移植可能是评价器官保存液的有效模型。