【摘 要】
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目的:探究过表达硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)对结肠腺癌细胞凋亡的影响及其机制.方法:收集我院30例结肠腺癌患者的结肠腺癌组织及癌旁组织,实时荧光定量PCR检测组织中TXNIP mRNA表达,免疫组织化学染色检测组织中自噬标志蛋白LC3-Ⅱ与凋亡标志蛋白Cleaved Caspase-3表达;将人结肠腺癌LoVo细胞随机分为对照组、阴性空载体组(LV-GFP)和TXNIP过表达组(LV-GFP-TXNIP),倒置荧光显微镜下观察细胞转染
【机 构】
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秦皇岛市骨科医院内科,河北 秦皇岛 066001;河北北方学院附属第一医院消化内科,河北 张家口 075000
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目的:探究过表达硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)对结肠腺癌细胞凋亡的影响及其机制.方法:收集我院30例结肠腺癌患者的结肠腺癌组织及癌旁组织,实时荧光定量PCR检测组织中TXNIP mRNA表达,免疫组织化学染色检测组织中自噬标志蛋白LC3-Ⅱ与凋亡标志蛋白Cleaved Caspase-3表达;将人结肠腺癌LoVo细胞随机分为对照组、阴性空载体组(LV-GFP)和TXNIP过表达组(LV-GFP-TXNIP),倒置荧光显微镜下观察细胞转染效率,收集转染72 h后的LoVo细胞,通过流式细胞术检测细胞凋亡,透射电子显微镜观察细胞自噬情况,免疫荧光染色检测细胞中LC3表达,Western blot检测细胞中自噬相关蛋白与凋亡相关蛋白表达变化.结果:与癌旁组织比较,结肠腺癌组织中TXNIP mRNA相对表达量显著降低(P<0.01),LC3-Ⅱ阳性表达率显著升高(P<0.05),Cleaved Caspase-3阳性表达率显著降低(P<0.05);慢病毒转染72 h后转染效率较高(P<0.05);与对照组比较,LV-GFP-TXNIP组LoVo细胞的凋亡率显著增加(P<0.05),细胞质较为致密,自噬体数目明显减少,LC3荧光染色减弱,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达显著下降(P<0.05),而LC3-I、p62蛋白表达显著增加(P<0.05),同时,Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达显著增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.05).结论:在结肠腺癌细胞中过表达TXNIP可通过抑制自噬来促进细胞凋亡.
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通过对年产30万t化机浆项目的木片输送生产线的自动化仪表工程设计和建设的分析,探讨了大型木片输送项目的工艺特点及自动化设备的关键要点和控制策略,以及生产过程中运用过程仪表、保护开关、PLC控制系统、视频监控系统等一体化技术实现对木片输送系统精准控制的方法.
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