【摘 要】
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目的 研究ABCC3基因与膀胱癌细胞增殖、耐药和有氧糖酵解的相关性.方法 利用脂质体2000将ABCC3 siRNA和对照siRNA分别转染人膀胱癌细胞系5637和UMUC-3细胞,并分为siABCC3-1组
【机 构】
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连云港市第二人民医院泌尿外科,连云港,222023
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目的 研究ABCC3基因与膀胱癌细胞增殖、耐药和有氧糖酵解的相关性.方法 利用脂质体2000将ABCC3 siRNA和对照siRNA分别转染人膀胱癌细胞系5637和UMUC-3细胞,并分为siABCC3-1组、siABCC3-2组和对照组.采用Western blot和实时荧光PCR技术检测转染细胞中ABCC3蛋白和mRNA的相对表达水平,通过集落形成实验检测ABCC3对膀胱癌细胞生长的影响,MTT实验检测癌细胞对顺铂的敏感性,并通过检测葡萄糖消耗、乳酸生成以及乳酸脱氢酶A活性了解ABCC3对有氧糖酵解的影响.计量资料用均数±标准差((x)±s)表示,组间比较采用单因素方差分析和LSD方法.结果 siRNA转染后膀胱癌细胞ABCC3和mRNA表达水平都显著下调;与对照组相比,siRNA干扰组集落形成数显著减少;5637细胞siABCC3-1和siABCC3-2干扰后的顺铂IC50值分别为4.02 μg/ml和3.91 μg/ml,UMUC-3细胞siABCC3-1和siABCC3-2干扰后的顺铂IC50值分别为2.54 μg/ml和2.49 μg/ml,与对照组相比,差异均有统计学意义;siRNA转染后膀胱癌细胞乳酸脱氢酶A蛋白表达下调,ABCC3与乳酸脱氢酶A的表达呈正相关(P=0.0362);siABCC3-1和siABCC3-2分别转染5637细胞后,葡萄糖消耗分别减少43.2％和43.7％,乳酸生成分别减少31.3％和29.7％,siABCC3-1和siABCC3-2分别转染UMUC-3细胞后,葡萄糖消耗分别减少33.4％和37.5％,乳酸生成分别减少24.7％和25.2％,与对照组相比,差异具有统计学意义(均P＜0.001).结论 ABCC3是参与膀胱癌细胞增殖、耐药和有氧糖酵解的重要癌蛋白,并有望成为膀胱癌的生物标志物和潜在的治疗靶点.
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