农杆菌介导β—葡糖苷酸酶基因转化巴戟天的研究

来源 :广州中医药大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tianstone
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[目的]建立一套农杆菌转化巴戟天的有效方法,为巴戟天新品种选育、引入外源目的基因奠定基础.[方法]以巴戟天带节茎为材料,工程农杆菌菌株为EHA101,Ti质粒上插入了β-葡糖苷酸酶(GUS)、新霉素磷酸转移酶(NPFⅡ)基因.[结果]将巴戟天带节茎进行遗传转化,头孢霉素用作抑菌剂,浓度为300mg·L-1.外植体与农杆菌共培养时间以3 d最好.卡那霉素作为选择试剂,浓度为50mg·L-1.GUS基因瞬时表达检测,70.5%的外植体呈阳性反应;GUS基因稳定表达检测,抗性植株中GUS反应
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