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建立可检测羊乳中掺伪牛乳的间接竞争ELISA方法。通过用牛口一酪蛋白免疫小鼠，制备可特异识别牛乳酪蛋白的单克隆抗体3B9。基于此抗体建立的ELISA的IC50值为92.8ng／mL牛奶蛋白，理论最低检测限0.35ng／mL，相对标准偏差小于12％。该方法也适用于检测高温高压处理的乳制品，加之操作简单高效，适合大规模高通量样品筛查及羊乳样本中牛奶蛋白半定量分析。