【摘 要】
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目的 建立染料法荧光PCR快速鉴别卵形疟原虫curtisi和wallikeri亚种.方法 比对卵形疟原虫curtisi和wollikeri亚种的网织红细胞结合蛋白2(porbp2)基因,设计特异性引物,建立扩
【机 构】
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青岛国际旅行卫生保健中心,山东青岛,266071;济宁国际旅行卫生保健中心;青岛流亭机场海关
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目的 建立染料法荧光PCR快速鉴别卵形疟原虫curtisi和wallikeri亚种.方法 比对卵形疟原虫curtisi和wollikeri亚种的网织红细胞结合蛋白2(porbp2)基因,设计特异性引物,建立扩增卵形疟原虫curtisi和wallikeri亚种的染料法荧光PCR方法,进行熔解曲线分析,测定各亚种扩增产物的熔解温度,进行特异性、重复性和准确性评价.结果 熔解曲线分析结果显示,建立的方法扩增卵形疟原虫curtisi和wallikeri亚种的熔解温度相差明显,curtisi亚种为74.2℃,wallikeri亚种为75.7℃.该方法虽可检测到其他3种疟原虫,但敏感度较低,卵形疟与其他3种疟原虫的熔解温度差别明显.重复性实验表明,该方法扩增卵形疟原虫curtisi和wallikeri亚种熔解温度变异系数均低于1％,重复性良好.对27份卵形疟原虫阳性样本的检测结果与巢式PCR分型结果完全一致.结论 建立的染料法荧光PCR方法可快速对两种亚型卵形疟原虫进行鉴别.
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