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目的 研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对人胚肺成纤维(human embryonic lung fibroblasts,HEL)细胞Cdtl与Geminin因子表达的影响.方法 用血清饥饿法同步化
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目的 研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染对人胚肺成纤维(human embryonic lung fibroblasts,HEL)细胞Cdtl与Geminin因子表达的影响.方法 用血清饥饿法同步化HEL细胞于G0/G1期,流式细胞术测细胞周期;用HCMV感染同步化的HEL细胞作为感染组,同时设模拟感染组为对照组.于感染后12、24、48、72和96 h收获细胞,提取总的RNA,采用半定量逆转录-聚合酶链反应检测Cdtl-mRNA和Geminin-mRNA的表达水平.结果 (1)血清饥饿后的HEL细胞82.8%处于G0/G1期.(2)12、24、48和72 h两组HEL细胞Cdtl mRNA表达水平比较均有统计学意义(t值分别为32.231,6.349,-5.846,-1.573;P均为0.000),12和24 h时感染组较模拟感染组明显降低,48和72 h时感染组较模拟感染组明显升高.(3)12、24、48和72 h两组HEL细胞Geminin mRNA表达水平比较均有统计学意义(t值分别为-8.891,-6.483,13.010,10.572;P均为0.000),12和24 h时感染组较模拟感染组明显增加,48和72 h时模拟感染组较感染组明显升高.结论 (1)血清饥饿法将绝大部分细胞同步于G0/G1期,血清饥饿法同步化HEL细胞效果较佳.(2)HCMV能诱导Cdtl及Geminin因子表达异常,使Geminin/Cdtl平衡失调,这可能是HCMV感染导致细胞周期阻滞于G1期的机制.
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