【摘 要】
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目的:探讨miR-19b对阿霉素(DOX)诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响.方法:采用DOX(250 ng/ml)诱导大鼠H9c2心肌细胞,构建心肌细胞损伤模型.通过MTT检测DOX作用12、24、48 h后的细
【机 构】
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同济天佑医院心血管内科,武汉 461000;上海市第十人民医院心内科,上海 200072
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目的:探讨miR-19b对阿霉素(DOX)诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响.方法:采用DOX(250 ng/ml)诱导大鼠H9c2心肌细胞,构建心肌细胞损伤模型.通过MTT检测DOX作用12、24、48 h后的细胞活力;miR-19b mimic和miR-19b inhibitor转染DOX诱导后的大鼠H9c2细胞,采用RT-PCR检测转染后细胞中miR-19b的表达情况,流式细胞术检测细胞内ROS水平和线粒体膜电位水平,ATP检测试剂盒检测细胞内ATP水平,Western blot检测线粒体凋亡相关蛋白Bad、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3、细胞色素C(Cyt-C)和p53的表达.结果:MTT结果显示DOX处理后,H9c2细胞的存活率显著降低(P<0.05);miR-19b mimic/inhibitor转染可显著上调或下调H9c2细胞中miR-19b的表达(P<0.05).与DOX组相比,miR-19b mimic组ROS水平降低,ATP水平升高(P<0.05)同时细胞凋亡减少,具体表现为线粒体低电位细胞比例减少,促凋亡相关蛋白Bad、Caspase-9、Caspase-3、Cyt-C和p53表达量降低(P<0.05),抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达量升高(P<0.05).而miR-19b inhibitor组ROS水平升高,ATP水平降低(P<0.05)同时细胞凋亡增加,具体表现为线粒体低电位细胞比例增加,Bad、Caspase-9、Caspase-3、Cyt-C和p53蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05).结论:miR-19b过表达能有效缓解DOX诱导的H9 c2心肌细胞线粒体凋亡.
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