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【摘要】 目的 探究免疫荧光病理检验的敏感性在狼疮性肾炎诊断中的作用。方法 使用直接的免疫荧光法对我院2011年2月——2013年4月入院治疗的200例狼疮性肾炎病患肾活检组织做免疫病理诊断分析。结果 IgG、IgA、IgM、C1q、C3显示结果均为阳性，这些指标的抗体沉积主要分布在II型、III型、IV型以及V型。当中分布最多的是IV型和V型。IgG、IgA等全部呈阳性病患在II型病患中约占四成以上，III型病患约占五成左右，IV型和V型全部在六成以上。结论 IgG、IgA、IgM、C1q、C3全部呈阳性的现象在IV型和V型狼疮性肾炎中发生的频率最高，是具有特征性病理的临床表现，因此提高对其阳性百分率的诊断标准，在治疗狼疮性肾炎上具有显著性意义。
【关键词】 免疫荧光病理检验；狼疮性肾炎；敏感性
文章编号：1004-7484（2013）-12-7081-01
在系统性红斑狼疮中，狼疮性肾炎是发生频率最高的并且对内脏的损害最为严重的并发症，致死率很高。在狼疮性肾炎的诊断过程中，经常需要使用免疫荧光病理检验的方式开展肾活检组织免疫病理分析。在本文的研究中，对我院200例病患的临床病历资料进行回顾式研究分析，寻求免疫荧光病理在不同病患中的敏感程度差异，从而提升狼疮性肾炎病患的临床诊断效率。
1 资料与方法
1.1 临床资料 选择我院2011年2月——2013年4月在我院进行肾穿刺活检的狼疮性肾炎病患200例，当中男性病患30例，女性病患170例，年龄最大的为67岁，最小的为10岁，平均年龄是（33±11）岁。
1.2 方法
1.2.1 肾活检 选择的最多的病患在右肾下方当成穿刺点，仪器均选择使用美国BARG公司制造的仪器，穿刺点一般情况下都是右肾下极。选择两条肾做穿刺组织。
1.2.2 病理学检验 将肾活检组织分别进行光镜、电镜和免疫荧光检查。当中免疫荧光病理要求是将肾组织保存在存有生理盐水的纱布冰瓶之中，并且在最短的时间内将其送去检查。
1.2.3 免疫荧光病理方法 肾组织经过光学相干断层扫描技术包埋之后，使用低温冰冻行切片操作，切片的厚度保持在4微米左右，并且使用四摄氏度的丙酮将其固定10分钟左右，使用磷酸盐缓冲液冲洗三次，加入异硫氰荧光素做记号。并且在37摄氏度的温度下操作3半个小时，之后再使用磷酸盐缓冲液冲洗三次。最后使用甘油进行封片操作，保存在四摄氏度的冰箱之中。
1.3 观察指标 使用Leica荧光显微镜观察IgG、IgA、IgM、C1q、C3等荧光抗体沉积的特点以及沉积的位置，并且依据视野范围内的荧光强度开始半定量分析。当上文中描述的荧光抗体在同一个肾小球当中全部出现沉积现象，并且沉积的强度全部在（+）以上，这种现象被称之为“满堂亮”。
1.4 统计学处理 本组数据采用SPSS18.0统计学软件对手中的数据进行处理与分析。当P<0.05时，具有统计学意义。
2 结 果
200例狼疮性肾炎病例中，Ⅰ型病患4例，Ⅱ型病患70例，Ⅲ型病患30例，Ⅳ型病患75例，Ⅴ型病患17例，Ⅵ型病患4例。IgG、IgA、IgM、C1q、C3等五种抗体全部集中分布在Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型以及Ⅴ型上，当中出现的最多的是后面两种。阳性率在各个病理的分型中差异显著，具有统计学意义（P<0.05），见表1。
因为Ⅰ型病患的IgG 抗体一般表现是阴性，Ⅵ型病患的C3大多是表现成阴性，所以两型病患全部都不会出现“满堂亮”的情况。
3 讨 论
狼疮性肾炎是自身免疫复合物性肾炎，其的病理变化形式相对复杂。在临床上将其分成六种类型，从低到高分别是轻微系膜病变性、系膜增生性、局灶性、弥漫性、膜性以及重度硬化性。因为各种病理分型之间经常互相转变，所以进行肾活检能够取得病理特征，但是也就仅仅反映的是其中一个阶段的病情变换情况[1]。
狼疮性肾炎病患自身有各种抗体，能够使用在肾小球上皮上、内皮下以及系膜区形成沉积状况，一般表现是IgG抗体和C3抗体有最为明显的沉积。可是其余三种的抗体也同样会有沉积的现象出现，这也是狼疮性肾炎的特性病理表现形式。因为免疫荧光病理在狼疮性肾炎的诊断过程中作用非常明显，所以需要提升“满堂亮”阳性百分率對于狼疮性肾炎的诊断具有显著性意义。
免疫荧光病理的基本原理是抗原和抗体之间的特异性结合，显著性优势是特异性显著，有较强的敏感度，定位也更加的准确，能够用来进行半定量分析操作。可是温度和时间以及抗体的有效评价等等各种因素都会造成染色效果出现差异[2]。所以，为了提升免疫荧光病理技术，我们在实际的使用工作中需要做到的内容包含：第一，最大程度的保存使用在免疫荧光检查的肾活检标本的抗原性，并且快速的将组织放置保存在湿润的生理盐水纱布之中，保存是放在四摄氏度左右的冰盒之中，并且要在最短的时间内送去检查；第二，抗体现配现用，并且根据说明书中的规定内容进行预先性试验，明确工作时的最佳浓度值；第三，滴加抗体之前需要使用免疫组化笔在每一个组织附近做画圈操作，这样可以使抗体在圈中能够覆盖在整个的组织切片之中，并且不会使相邻的组织当中的抗体做互相干扰[3]。
在本次研究中显示，满堂亮现象出现较多的是在Ⅳ型以及Ⅴ型之中，其他型的病患出现的较少甚至不会出现，这次研究中的数据和很多的其他研究资料相一致。
参考文献
[1] 肖慧捷，刘景成，杨霁云.肾活检免疫荧光病理呈“满堂亮”现象临床意义的探讨（附50例病例分析）[J].中华儿科杂志，2011，39（13）：151-153.
[2] 龚志锦，詹镕洲.病理组织制片和染色技术[M].上海科学技术出版社，2009：359.
[3] 赵秀芬，钱军，邢昌赢.免疫荧光病理检验的敏感性在狼疮性肾炎诊断中发的意义[J].江苏医药，2012，34（12）：125-126.
【关键词】 免疫荧光病理检验；狼疮性肾炎；敏感性
文章编号：1004-7484（2013）-12-7081-01
在系统性红斑狼疮中，狼疮性肾炎是发生频率最高的并且对内脏的损害最为严重的并发症，致死率很高。在狼疮性肾炎的诊断过程中，经常需要使用免疫荧光病理检验的方式开展肾活检组织免疫病理分析。在本文的研究中，对我院200例病患的临床病历资料进行回顾式研究分析，寻求免疫荧光病理在不同病患中的敏感程度差异，从而提升狼疮性肾炎病患的临床诊断效率。
1 资料与方法
1.1 临床资料 选择我院2011年2月——2013年4月在我院进行肾穿刺活检的狼疮性肾炎病患200例，当中男性病患30例，女性病患170例，年龄最大的为67岁，最小的为10岁，平均年龄是（33±11）岁。
1.2 方法
1.2.1 肾活检 选择的最多的病患在右肾下方当成穿刺点，仪器均选择使用美国BARG公司制造的仪器，穿刺点一般情况下都是右肾下极。选择两条肾做穿刺组织。
1.2.2 病理学检验 将肾活检组织分别进行光镜、电镜和免疫荧光检查。当中免疫荧光病理要求是将肾组织保存在存有生理盐水的纱布冰瓶之中，并且在最短的时间内将其送去检查。
1.2.3 免疫荧光病理方法 肾组织经过光学相干断层扫描技术包埋之后，使用低温冰冻行切片操作，切片的厚度保持在4微米左右，并且使用四摄氏度的丙酮将其固定10分钟左右，使用磷酸盐缓冲液冲洗三次，加入异硫氰荧光素做记号。并且在37摄氏度的温度下操作3半个小时，之后再使用磷酸盐缓冲液冲洗三次。最后使用甘油进行封片操作，保存在四摄氏度的冰箱之中。
1.3 观察指标 使用Leica荧光显微镜观察IgG、IgA、IgM、C1q、C3等荧光抗体沉积的特点以及沉积的位置，并且依据视野范围内的荧光强度开始半定量分析。当上文中描述的荧光抗体在同一个肾小球当中全部出现沉积现象，并且沉积的强度全部在（+）以上，这种现象被称之为“满堂亮”。
1.4 统计学处理 本组数据采用SPSS18.0统计学软件对手中的数据进行处理与分析。当P<0.05时，具有统计学意义。
2 结 果
200例狼疮性肾炎病例中，Ⅰ型病患4例，Ⅱ型病患70例，Ⅲ型病患30例，Ⅳ型病患75例，Ⅴ型病患17例，Ⅵ型病患4例。IgG、IgA、IgM、C1q、C3等五种抗体全部集中分布在Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型以及Ⅴ型上，当中出现的最多的是后面两种。阳性率在各个病理的分型中差异显著，具有统计学意义（P<0.05），见表1。
因为Ⅰ型病患的IgG 抗体一般表现是阴性，Ⅵ型病患的C3大多是表现成阴性，所以两型病患全部都不会出现“满堂亮”的情况。
3 讨 论
狼疮性肾炎是自身免疫复合物性肾炎，其的病理变化形式相对复杂。在临床上将其分成六种类型，从低到高分别是轻微系膜病变性、系膜增生性、局灶性、弥漫性、膜性以及重度硬化性。因为各种病理分型之间经常互相转变，所以进行肾活检能够取得病理特征，但是也就仅仅反映的是其中一个阶段的病情变换情况[1]。
狼疮性肾炎病患自身有各种抗体，能够使用在肾小球上皮上、内皮下以及系膜区形成沉积状况，一般表现是IgG抗体和C3抗体有最为明显的沉积。可是其余三种的抗体也同样会有沉积的现象出现，这也是狼疮性肾炎的特性病理表现形式。因为免疫荧光病理在狼疮性肾炎的诊断过程中作用非常明显，所以需要提升“满堂亮”阳性百分率對于狼疮性肾炎的诊断具有显著性意义。
免疫荧光病理的基本原理是抗原和抗体之间的特异性结合，显著性优势是特异性显著，有较强的敏感度，定位也更加的准确，能够用来进行半定量分析操作。可是温度和时间以及抗体的有效评价等等各种因素都会造成染色效果出现差异[2]。所以，为了提升免疫荧光病理技术，我们在实际的使用工作中需要做到的内容包含：第一，最大程度的保存使用在免疫荧光检查的肾活检标本的抗原性，并且快速的将组织放置保存在湿润的生理盐水纱布之中，保存是放在四摄氏度左右的冰盒之中，并且要在最短的时间内送去检查；第二，抗体现配现用，并且根据说明书中的规定内容进行预先性试验，明确工作时的最佳浓度值；第三，滴加抗体之前需要使用免疫组化笔在每一个组织附近做画圈操作，这样可以使抗体在圈中能够覆盖在整个的组织切片之中，并且不会使相邻的组织当中的抗体做互相干扰[3]。
在本次研究中显示，满堂亮现象出现较多的是在Ⅳ型以及Ⅴ型之中，其他型的病患出现的较少甚至不会出现，这次研究中的数据和很多的其他研究资料相一致。
参考文献
[1] 肖慧捷，刘景成，杨霁云.肾活检免疫荧光病理呈“满堂亮”现象临床意义的探讨（附50例病例分析）[J].中华儿科杂志，2011，39（13）：151-153.
[2] 龚志锦，詹镕洲.病理组织制片和染色技术[M].上海科学技术出版社，2009：359.
[3] 赵秀芬，钱军，邢昌赢.免疫荧光病理检验的敏感性在狼疮性肾炎诊断中发的意义[J].江苏医药，2012，34（12）：125-126.