研究含有CpG基序的寡聚脱氧核苷酸2395(CpG ODN2395)对鼠巨细胞病毒(MCMV)肝炎新生小鼠的治疗作用及相关机制。
方法SPF级BALB/c新生小鼠，按窝随机分为对照组、病毒组和治疗组。对照组：腹腔注射9 g/L盐水20×10-6 L隔日1次；病毒组：腹腔注射MCMV(病毒致半数细胞感染量TCID50＝108.31/L)20×10-6 L 1次，从接种MCMV当日起隔日腹腔注射9 g/L盐水20×10-6 L；CpG治疗组：腹腔注射MCMV(TCID50＝108.31/L) 20×10-6 L 1次，从接种MCMV当日起隔日腹腔注射CpG ODN2395 20 mg/kg。观测小鼠的生长发育情况。HE染色观察肝脏病理，酶联免疫吸附试验检测小鼠血清ALT、IFN-α，PCR法检测肝脏MCMV DNA，反转录(RT)-PCR法检测肝脏IFN-α mRNA，Wester blot法检测肝脏的Toll样受体9(TLR9)和衔接蛋白-髓样分化标志物88(MyD88)的表达水平。应用SPSS 16.0软件进行分析。
结果1.病毒组小鼠生长发育落后，体质量低于对照组和治疗组，7 d、14 d时差异有统计学意义(F＝18.919、25.543，P均<0.05)；治疗组发育介于对照组和病毒组之间，体质量均低于对照组，在7 d时差异有统计学意义(t＝3.187，P<0.05)。2.病毒组小鼠血清ALT高于对照组和治疗组，治疗组血清ALT高于对照组，差异均有统计学意义(F＝11.407、11.791、154.565，P均<0.05)。3.肝组织病理改变：病毒组肝组织病变活动性积分(HAI)值在第3天达高峰，以后逐渐下降；治疗组肝组织HAI均值也在第3天达高峰，但肝损害明显轻于病毒组，以后肝病变逐渐减轻，在第7天和第14天时HAI均值都显著低于病毒组。4.病毒组和治疗组小鼠3 d、7 d和14 d时肝脏MCMV DNA PCR检测阳性，3个时间点治疗组MCMV DNA负荷量均低于病毒组。5.病毒组和治疗组的3 d时血清IFN-α达高峰，7 d、14 d时渐下降；治疗组的血清IFN-α高于病毒组和对照组。6.病毒组和治疗组肝脏IFN-α mRNA表达水平在3 d时增加，7 d时达高峰，14 d时下降，3个时间点表达水平差异有统计学意义。治疗组IFN-α mRNA表达水平高于病毒组和对照组，病毒组高于对照组。7.治疗组肝脏TLR9表达水平高于病毒组和对照组，病毒组高于对照组。治疗组肝脏MyD88表达水平高于病毒组和对照组，病毒组高于对照组。
结论CpG ODN2395可能提高TLR9的表达水平，通过MyD88依赖途径激活IFN-α的分泌，抑制MCMV的复制，减轻新生小鼠MCMV肝炎肝功能损害，改善肝脏病变和降低肝脏病毒负荷量具有抗MCMV的活性作用。