一种针对丝状真菌的改进的菌落——滤膜——杂交程序

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丝状真菌的菌落-滤膜杂交程序很繁琐,因为真菌细胞壁的酶消化效率低,不均一,而且菌落的生长也不均匀。但通过杂交快速筛查很多菌落中稀有核苷酸序列对于某些方面的应用是合适和必要的。对于链抱霉属已提出了3种方法。这些方法通过单独培养各个菌落和把分生抱子悬液转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上来克眼不均一生长的问题。短期培养后,滤膜用glusulase(sigma)或Novozyme234(InterspekProductsInc)饱和以消化真菌细胞壁。第三种方法通过更换有机抽提和碱裂解来减少酶消化,并用Whatman54
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