甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶基因(secda5)的原核表达及多克隆抗体制备

• 作 者: 李景 杨宝东 郭巍
• 机 构: 北京农学院植物科学技术学院
• 出 处: 北京农学院学报
• 发表日期: 2016年1期
• 关键词: 甜菜夜蛾 secda5 基因克隆 原核表达 抗体制备
• 基金项目: 国家自然科学基金项目(31471775);现代农业产业技术体系项目(CARS-14);2014年北京农学院学位与研究生教育改革与发展项目

【目的】几丁质脱乙酰酶(Chitin deacetylase,CDA,EC 3.5.1.41)是昆虫几丁质代谢中的一种关键酶,在昆虫生长、发育和代谢中具有重要作用。本研究旨在克隆甜菜夜蛾secda5基因,对其进行原核表达,同时制备其蛋白的多克隆抗体。【方法】以pMD19-T-secda5重组质粒为模板,通过PCR技术获得编码甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)中肠几丁质脱乙酰酶secda5全长基因,连接pET-28a载体并转化E.coli BL21(DE3)构建工程菌。以不同IPTG浓度、培养温