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目的
观察姜黄素介导的光动力疗法(PDT)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及其生物膜活性的影响。
方法先用单态氧荧光探针(SOSG)验证光动力下姜黄素产生活性氧(ROS);后实验对象为MRSA悬液和MRSA生物膜,均分为姜黄素组、PDT组、姜黄素-PDT组、空白对照组4组。姜黄素组和姜黄素-PDT组分别设置不同浓度剂量组(1.00、6.25、12.50、25.00 μmol/L)。PDT处理为450 nm波长光源照射(辐照度1 W/cm2)。稀释平板法检测MRSA浮游菌存活率,MTT法测定生物膜内MRSA存活率。MRSA生物膜通过扫描电镜观察鉴定。应用SPSS 20.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,各组间比较用方差分析。组间差异有统计学意义时进行组间两两比较的SNK-q检验。
结果姜黄素光动力下产生ROS呈浓度依赖性;浓度一定时,ROS量5 min后趋于稳定。实验浓度范围内,姜黄素-PDT组对MRSA浮游菌及生物膜内细菌的杀伤作用呈姜黄素浓度依赖性,浓度为25 μmol/L时,存活率分别降至(0.38±0.32)%、(34.50±1.44)%,同时,扫描电镜结果显示生物膜完整性破坏明显。姜黄素组、PDT组与空白对照组比较,差异无统计学意义(t=0.28、0.71,P>0.05)。
结论姜黄素介导PDT体外对MRSA浮游菌及生物膜内MRSA均有浓度依赖性的杀伤作用,同时还可有效破坏MRSA生物膜结构。