登革2型病毒非结构蛋白NS4B及其突变体的真核表达与鉴定

• 作 者: 赵慧 刘忠钰 秦成峰 秦鄂德
• 机 构: 军事医学科学院微生物流行病研究所
• 出 处: 生物技术通讯
• 发表日期: 2008年4期
• 关键词: 登革病毒 非结构蛋白NS4B 真核表达 dengue virus nonstructural protein 4B enkaryotic expression
• 基金项目: 国家自然科学基金（30600530）

目的：构建登革2型病毒非结构蛋白NS4B及其突变体Δ2K-NS4B基因的真核载体,并观察二者在哺乳动物细胞内的定位情况。方法：从登革2型病毒43株的全长cDNA克隆载体上扩增获得编码NS4B及缺失2K片段的NS4B突变体Δ2K-NS4B的基因;通过基因重组的方法分别将2段基因克隆入真核表达载体pcDNA6/V5-HisA,获得重组真核表达载体pc/D2-NS4B和pc/D2-Δ2K-NS4B;经脂质体法转染BHK-21细胞后,用RT-PCR、间接免疫荧光和Western印迹鉴定表达的蛋白。结果：重组蛋白D