【摘 要】
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目的 探讨DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-dC)对食管鳞状细胞癌细胞株KYSE140和KYSE150生物学行为的影响.方法 KYSE140、KYSE150细胞分别设空白组、对照组和实验组,
【机 构】
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山西医科大学转化医学研究中心 食管癌发病机理及转化研究山西省重点实验室 细胞生理学省部共建教育部重点实验室,太原,030001;山西医科大学第一医院神经外科,太原,030001;
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目的 探讨DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-dC)对食管鳞状细胞癌细胞株KYSE140和KYSE150生物学行为的影响.方法 KYSE140、KYSE150细胞分别设空白组、对照组和实验组,空白组细胞不做处理,对照组细胞中加入2 μmol/L二甲基亚砜(DMSO),实验组应用浓度为1、2、3、4 μmol/L 5-Aza-dC分别作用24、48、72、96 h.四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物对细胞增殖能力的影响,选择药物作用的最佳浓度和时间;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力的改变;流式细胞术检测药物对细胞凋亡和细胞周期的影响;蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白PARP、Caspase-3和周期调控相关蛋白CCNB-1、CCNE-1的表达.结果 MTT法检测结果显示5-Aza-dC对KYSE140和KYSE150细胞最佳作用时间为96 h,最佳浓度为4 μmol/L.在此条件下,肿瘤细胞迁移、侵袭能力下降,空白组、对照组、实验组KYSE140和KYSE150细胞的迁移细胞数分别为(193.3±8.6)、(184.0±10.4)、(61.7±7.1)个和(112.0±6.4)、(101.3±7.9)、(26.3±5.7)个,侵袭细胞数分别为(47.3±7.3)、(38.7±5.1)、(8.0± 3.9)个和(83.3±6.8)、(74.7±5.7)、(21.0±2.7)个,差异均有统计学意义(均P<0.05).5-Aza-dC促进KYSE140和KYSE150细胞凋亡,空白组、对照组、实验组细胞凋亡率分别为(2.8±0.3)%、(11.2± 0.7)%、(18.6±0.6)%和(2.7±0.4)%、(9.8±0.4)%、(17.7±0.5)%,实验组较空白组、对照组G2/M期细胞比例增加,差异均有统计学意义(均P<0.05).实验组中凋亡相关蛋白PARP、Caspase-3剪切作用增强,周期相关蛋白CCNB-1表达升高,CCNE-1表达降低.结论 5-Aza-dC可以抑制食管鳞状细胞癌细胞的增殖,促进其凋亡.
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