两步扩增法在玉米抗大斑病相关基因片段分离中的应用

• 作 者: 谷守芹 王海祥 范永山 韩建民 董金皋
• 机 构: 河北农业大学,保定师范专科学校,河北农业大学
• 出 处: 河北农业大学学报
• 发表日期: 2005年1期
• 关键词: 玉米 两步扩增法 玉米大斑病 抗病相关基因 corn two-step amplification method Northern corn leaf bl

对一步扩增法和两步扩增法在DDRT-PCR中的扩增效率进行了比较,结果发现,两种方法得到的片段大小都在150～1500bp之间,但条带数量和清晰度不同.一步扩增法得到扩增条带为30～45条,条带较模糊,两步扩增法得到的扩增条带为40～60条,条带清晰.一步扩增法获得10条玉米抗大斑病差异表达条带,只有55条带中的cDNA能够成功回收并产生有效扩增,差异条带回收率53.9%,而两步扩增法获得了148条差异条带,其中138条带都能得到有效回收和扩增,回收率达93.2%.因此,步扩增法更有利于差异条带的回收和二