【摘 要】
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目的 探讨马钱子碱诱导人类多发性骨髓瘤U266细胞凋亡的机制.方法 通过MTT法、流式细胞术、RT-PCR法检测及形态学观察马钱子碱诱导人类多发性骨髓瘤U266细胞株凋亡的途径.结
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目的 探讨马钱子碱诱导人类多发性骨髓瘤U266细胞凋亡的机制.方法 通过MTT法、流式细胞术、RT-PCR法检测及形态学观察马钱子碱诱导人类多发性骨髓瘤U266细胞株凋亡的途径.结果 马钱子碱诱导U266的凋亡呈时间和浓度依赖性,48 h IC50 0.16 mg/ml.Hoechst 33258染色后在荧光显微镜下观察到明显的凋亡小体.Rhodamine 123染色后流式细胞术检测马钱子碱不同浓度下线粒体膜电位的变化差异无统计学意义(P＞0.05).RT-PCR检测到马钱子碱作用12、24、48 h后Caspase-3表达量增加,其灰度值(0.2597±0.020)、(0.5488±0.016)、(0.6205±0.006)、(0.6533±0.009)(P＞0.05);分别加入Caspase-8与Caspase-9的特异抑制剂z-IETD-fmk、z-LEHD-fmk后检测Caspase-3的表达变化,其灰度值分别为(0.7118±0.006)、(0.2637±0.003)(P＜0.01);(0.7182±0.004)、(0.7195±0.003)(P=0.836),提示Caspase-8被激活.结论 在0.4 mg/ml浓度范围内,马钱子碱具有诱导U266细胞凋亡作用,激活Caspase-8经死亡受体途径诱导U266细胞株凋亡.
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