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摘 要：含腐植酸水溶肥料对葡萄对单果重影响不明显，可极显著的增加葡萄的可溶性固形物含量，对果实 Vc和总蛋白含量也有不同程度的影响。
关键词：葡萄；腐植酸；可溶性固形物；维生素C；总蛋白；单果重
中图分类号：S641 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20160230039
腐植酸主要是动物、植物的遗骸，经过微生物的分解和转化以及地球化学的一系列过程形成和积累起来的成分复杂的天然有机质[1]。腐植酸应用广泛不仅关系工业、医药、环保等领域，在农业中也得到广泛推崇，目前主要应用于提高肥料的利用率，增强作物的抗逆性，改良土壤，刺激作物代谢活动[2]，提高农作物对养分的利用[3]，提升农作物的产量和品质等[4-7]
葡萄（Grapes）上海各郊县都有大面积的种植。因其富含大量的矿物质、多种氨基酸和蛋白质等营养物质，在水果中一直被冠以“水果之王”的美称[8]，受到人们的喜爱。葡萄的品质评价指标较多[9]。研究表明，不同肥料不同施肥方法对葡萄有不同影响。本文研究所使用的含腐植酸水溶肥料是将蚯蚓发酵液与黄腐植酸及其他营养要素进行螯合而成，使肥料具有营养全面、生态环保等特点。探究含腐植酸肥料对梨生长长势和果实产量及品质的影响，探究含腐植酸肥料对单果重、可溶性固形物、维生素C（Vc）和总蛋白含量的影响，成为含腐植酸进一步在葡萄上推广的科学依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料与仪器
1.1.1 材料
葡萄（Grapes）：试验材料是上海农科院庄行试验总站提供的‘矢富罗莎’葡萄，所用肥料成分：腐植酸≥30g/L；氮、磷、钾总量≥200g/L（氮≥20g/L，磷≥20g/L，钾≥20g/L）；水不溶物含量≤50g/L；pH：4.0～10.0。
1.1.2 试剂
硫酸（比重1.84）；NaOH溶液、2%的硼酸、0.1NHCl、硒片（定氮高效催化剂）或硒 无水硫酸钠（1：1000）、0.1%甲基红 0.5%溴甲酚绿（1：1）、草酸2%、抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）、2，6-二氯靛酚（2，6-二氯靛酚吲哚酚钠盐）溶液；白陶土、蒸馏水。
1.1.3 仪器
手持折光仪、刻度尺、KDN智能定氮仪、消化炉、天平、滴定管、烧杯、三角烧瓶、容量瓶、分析天平、锥形瓶、吸管、漏斗等。
1.2 地点
上海市农科院庄行试验总站
1.3 方法
1.3.1 施肥方案
选取上海市农科院庄行试验总站矢富罗莎葡萄品种为试验施肥对象，把试验共设3个处理，再进行3次重复，9个小区随机排列，每个小区对9株葡萄进行施肥，共计81株葡萄树。
处理1：每株树每次施用“坤之缘”蚯蚓有机肥250ml兑水稀释100倍在萌芽前期、新叶期、开花期、膨果期和转色期5个阶段进行施肥。
处理2：每株树每次施用“坤之缘”蚯蚓有机肥500ml兑水稀释100倍在萌芽前期、新叶期、开花期、膨果期和转色期5个阶段进行施肥。
处理3：每株树每次施用“坤之缘”蚯蚓有机肥750ml兑水稀释100倍在萌芽前期、新叶期、开花期、膨果期和转色期5个阶段进行施肥。
对照：正常使用普通复合肥等其他肥料在萌芽前期、新叶期、开花期、膨果期和转色期5个阶段进行施肥，作为实验对照。
分别在3个处理的葡萄新叶期、装果期和转色期施用叶面肥3次，91株果树共计施用1.5kg。
1.3.2 施肥方法
为了达到精准、节约、高效的施肥，在距离葡萄根本40cm处开出浅沟，将稀释好的肥料冲施在沟内，液肥顺浅沟渗入土壤，避免流失造成浪费。
1.3.3 施肥时间
2月3日为萌芽前期、3月1日为新叶期、4月14日为开花期、6月18日为膨果期和7月1为转色期
1.4 数据测量
1.4.1 蛋白质的测量
称取试样0.5～1g，置入消化管中，加入催化剂定氮硒1～2片和10ml硫酸。置于消化炉上。温度设定在400～450℃，1小时左右待样品变色即消化完毕。取250ml三角瓶加入50ml 2%硼酸和2～3滴混合指示剂（0.1%甲基红 0.5%溴甲酚绿（1：1）），先后向消化管内注入蒸馏水（20ml左右）和氢氧化钠溶液（是硫酸的5倍）开始蒸馏，蒸馏6～8min。蒸馏完毕后用0.1N浓度的HCl滴定接受瓶内的接受液，观察液体颜色由绿色变为淡紫色时为止，记下消耗HCl的量，按照标准曲线计算公式计算蛋白质含量。
1.4.2 Vc的测量
称取制备好的样品100g，加100ml浸提剂，迅速捣成匀浆。称10～40g浆状样品，用浸提剂将样品移入100ml容量瓶，并稀释至刻度，摇匀过滤。若滤液有色，可按每克样品加0.4g白陶土脱色后再过滤。吸取10ml滤液放入50ml锥形瓶中，用已标定过的 2，6-二氯靛酚溶液滴定，直至溶液呈粉红色 15s不褪色为止。做空白试验。按照标准曲线计算公式计算Vc含量。
2 结果与分析
2.1 不同浓度蚯蚓有机肥对葡萄可溶性固形物的影响
表1显示：处理1、处理2和处理3随着肥量的增加可溶性固形物也随之增加，且与对照的可溶性固形物都有极显著水平的差异。
2.2 不同浓度蚯蚓有机肥对葡萄单果重的影响
表2显示：处理1、处理2 和处理3与对照之间均表现未达到显著水平，处理1、处理2和处理3与对照的单果重虽然差异显著性不明显，但都有增长趋势。
2.3 不同浓度蚯蚓有机肥对葡萄蛋白质和Vc含量的影响
图1 不同浓度蚯蚓有机肥处理的葡萄蛋白质含量的关系 图2 不同浓度蚯蚓有机肥处理的葡萄Vc含量的关系
从图1和图2可以看出施含腐植酸水溶肥料对“矢富罗莎”葡萄维生素C和蛋白质含量相比对照都有不同程度的增加，其中处理3的增加最为明显。
3 讨论与小结
本研究结果表明，施含腐植酸水溶肥料对提升“矢富罗莎”葡萄的可溶性固形物含量，与对照相比有着显著的促进作用，其促进程度随液肥用量的增加而提升。施含腐植酸水溶肥料对提升“矢富罗莎”葡萄果实的单果重、维生素C、蛋白质含量虽无显著影响，但施用该肥料不同处理水平的该肥料各项指标均不低于常规施肥。
由于葡萄是多年生作物，其树体本身具有一定的养分积累，这对其营养生长、生殖生长均有一定的影响。而本试验目前尚处于前期阶段，含腐植酸水溶肥料肥对葡萄生长影响的研究需持续下去。
参考文献
[1] 王曰鑫，李成学.绿色环保型腐植酸磷肥[M].北京化学工业出版社，2009.
[2] 程亮，张保林，王杰等.腐植酸肥料的研究进展[J].中国土壤与肥料，2011（5）：1-6.
[3] 孙静，白迎娟，左威.液体腐植酸肥试验应用效果初报[J].腐植酸，2004（2）：33-36.
[4] 童文，孙佩，杨晓等.施用腐植酸肥对白芷产量和质量的影响[J].西南农业大学学报，2011，24（3）：1236-1238.
[5] 彭志对，黄继川，于俊红等.施用腐植酸肥料对茶叶产量和品质的影响[J].广东农业科学，2012（22）：6-8.
[6] 汤丹，冷明珠，钱义荣等.含腐植酸喷施宝水溶肥料对安吉白茶产量和经济效益的影响[J].腐植酸，2014（4）：50-52.
[7] 谭蓉，王静，高文等.腐植酸可溶性有机肥影响茶叶品质的研究[J].食品安全质量检测学报，2015（4）：1329-1332.
[8] 王晨，房经贵，刘洪等.葡萄与葡萄酒的营养成分[J].江苏林业科技2009，36（4）：38-41.
[9] 李记明.关于葡萄品质的评价指标[J].中外葡萄与葡萄酒SINO-OVERSEAS GRAPEV INE
关键词：葡萄；腐植酸；可溶性固形物；维生素C；总蛋白；单果重
中图分类号：S641 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20160230039
腐植酸主要是动物、植物的遗骸，经过微生物的分解和转化以及地球化学的一系列过程形成和积累起来的成分复杂的天然有机质[1]。腐植酸应用广泛不仅关系工业、医药、环保等领域，在农业中也得到广泛推崇，目前主要应用于提高肥料的利用率，增强作物的抗逆性，改良土壤，刺激作物代谢活动[2]，提高农作物对养分的利用[3]，提升农作物的产量和品质等[4-7]
葡萄（Grapes）上海各郊县都有大面积的种植。因其富含大量的矿物质、多种氨基酸和蛋白质等营养物质，在水果中一直被冠以“水果之王”的美称[8]，受到人们的喜爱。葡萄的品质评价指标较多[9]。研究表明，不同肥料不同施肥方法对葡萄有不同影响。本文研究所使用的含腐植酸水溶肥料是将蚯蚓发酵液与黄腐植酸及其他营养要素进行螯合而成，使肥料具有营养全面、生态环保等特点。探究含腐植酸肥料对梨生长长势和果实产量及品质的影响，探究含腐植酸肥料对单果重、可溶性固形物、维生素C（Vc）和总蛋白含量的影响，成为含腐植酸进一步在葡萄上推广的科学依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料与仪器
1.1.1 材料
葡萄（Grapes）：试验材料是上海农科院庄行试验总站提供的‘矢富罗莎’葡萄，所用肥料成分：腐植酸≥30g/L；氮、磷、钾总量≥200g/L（氮≥20g/L，磷≥20g/L，钾≥20g/L）；水不溶物含量≤50g/L；pH：4.0～10.0。
1.1.2 试剂
硫酸（比重1.84）；NaOH溶液、2%的硼酸、0.1NHCl、硒片（定氮高效催化剂）或硒 无水硫酸钠（1：1000）、0.1%甲基红 0.5%溴甲酚绿（1：1）、草酸2%、抗坏血酸标准溶液（1mg/ml）、2，6-二氯靛酚（2，6-二氯靛酚吲哚酚钠盐）溶液；白陶土、蒸馏水。
1.1.3 仪器
手持折光仪、刻度尺、KDN智能定氮仪、消化炉、天平、滴定管、烧杯、三角烧瓶、容量瓶、分析天平、锥形瓶、吸管、漏斗等。
1.2 地点
上海市农科院庄行试验总站
1.3 方法
1.3.1 施肥方案
选取上海市农科院庄行试验总站矢富罗莎葡萄品种为试验施肥对象，把试验共设3个处理，再进行3次重复，9个小区随机排列，每个小区对9株葡萄进行施肥，共计81株葡萄树。
处理1：每株树每次施用“坤之缘”蚯蚓有机肥250ml兑水稀释100倍在萌芽前期、新叶期、开花期、膨果期和转色期5个阶段进行施肥。
处理2：每株树每次施用“坤之缘”蚯蚓有机肥500ml兑水稀释100倍在萌芽前期、新叶期、开花期、膨果期和转色期5个阶段进行施肥。
处理3：每株树每次施用“坤之缘”蚯蚓有机肥750ml兑水稀释100倍在萌芽前期、新叶期、开花期、膨果期和转色期5个阶段进行施肥。
对照：正常使用普通复合肥等其他肥料在萌芽前期、新叶期、开花期、膨果期和转色期5个阶段进行施肥，作为实验对照。
分别在3个处理的葡萄新叶期、装果期和转色期施用叶面肥3次，91株果树共计施用1.5kg。
1.3.2 施肥方法
为了达到精准、节约、高效的施肥，在距离葡萄根本40cm处开出浅沟，将稀释好的肥料冲施在沟内，液肥顺浅沟渗入土壤，避免流失造成浪费。
1.3.3 施肥时间
2月3日为萌芽前期、3月1日为新叶期、4月14日为开花期、6月18日为膨果期和7月1为转色期
1.4 数据测量
1.4.1 蛋白质的测量
称取试样0.5～1g，置入消化管中，加入催化剂定氮硒1～2片和10ml硫酸。置于消化炉上。温度设定在400～450℃，1小时左右待样品变色即消化完毕。取250ml三角瓶加入50ml 2%硼酸和2～3滴混合指示剂（0.1%甲基红 0.5%溴甲酚绿（1：1）），先后向消化管内注入蒸馏水（20ml左右）和氢氧化钠溶液（是硫酸的5倍）开始蒸馏，蒸馏6～8min。蒸馏完毕后用0.1N浓度的HCl滴定接受瓶内的接受液，观察液体颜色由绿色变为淡紫色时为止，记下消耗HCl的量，按照标准曲线计算公式计算蛋白质含量。
1.4.2 Vc的测量
称取制备好的样品100g，加100ml浸提剂，迅速捣成匀浆。称10～40g浆状样品，用浸提剂将样品移入100ml容量瓶，并稀释至刻度，摇匀过滤。若滤液有色，可按每克样品加0.4g白陶土脱色后再过滤。吸取10ml滤液放入50ml锥形瓶中，用已标定过的 2，6-二氯靛酚溶液滴定，直至溶液呈粉红色 15s不褪色为止。做空白试验。按照标准曲线计算公式计算Vc含量。
2 结果与分析
2.1 不同浓度蚯蚓有机肥对葡萄可溶性固形物的影响
表1显示：处理1、处理2和处理3随着肥量的增加可溶性固形物也随之增加，且与对照的可溶性固形物都有极显著水平的差异。
2.2 不同浓度蚯蚓有机肥对葡萄单果重的影响
表2显示：处理1、处理2 和处理3与对照之间均表现未达到显著水平，处理1、处理2和处理3与对照的单果重虽然差异显著性不明显，但都有增长趋势。
2.3 不同浓度蚯蚓有机肥对葡萄蛋白质和Vc含量的影响
图1 不同浓度蚯蚓有机肥处理的葡萄蛋白质含量的关系 图2 不同浓度蚯蚓有机肥处理的葡萄Vc含量的关系
从图1和图2可以看出施含腐植酸水溶肥料对“矢富罗莎”葡萄维生素C和蛋白质含量相比对照都有不同程度的增加，其中处理3的增加最为明显。
3 讨论与小结
本研究结果表明，施含腐植酸水溶肥料对提升“矢富罗莎”葡萄的可溶性固形物含量，与对照相比有着显著的促进作用，其促进程度随液肥用量的增加而提升。施含腐植酸水溶肥料对提升“矢富罗莎”葡萄果实的单果重、维生素C、蛋白质含量虽无显著影响，但施用该肥料不同处理水平的该肥料各项指标均不低于常规施肥。
由于葡萄是多年生作物，其树体本身具有一定的养分积累，这对其营养生长、生殖生长均有一定的影响。而本试验目前尚处于前期阶段，含腐植酸水溶肥料肥对葡萄生长影响的研究需持续下去。
参考文献
[1] 王曰鑫，李成学.绿色环保型腐植酸磷肥[M].北京化学工业出版社，2009.
[2] 程亮，张保林，王杰等.腐植酸肥料的研究进展[J].中国土壤与肥料，2011（5）：1-6.
[3] 孙静，白迎娟，左威.液体腐植酸肥试验应用效果初报[J].腐植酸，2004（2）：33-36.
[4] 童文，孙佩，杨晓等.施用腐植酸肥对白芷产量和质量的影响[J].西南农业大学学报，2011，24（3）：1236-1238.
[5] 彭志对，黄继川，于俊红等.施用腐植酸肥料对茶叶产量和品质的影响[J].广东农业科学，2012（22）：6-8.
[6] 汤丹，冷明珠，钱义荣等.含腐植酸喷施宝水溶肥料对安吉白茶产量和经济效益的影响[J].腐植酸，2014（4）：50-52.
[7] 谭蓉，王静，高文等.腐植酸可溶性有机肥影响茶叶品质的研究[J].食品安全质量检测学报，2015（4）：1329-1332.
[8] 王晨，房经贵，刘洪等.葡萄与葡萄酒的营养成分[J].江苏林业科技2009，36（4）：38-41.
[9] 李记明.关于葡萄品质的评价指标[J].中外葡萄与葡萄酒SINO-OVERSEAS GRAPEV INE