乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及其表达

• 作 者: 陶小红 任红 沈鼎明 古柏燕 张大志 叶珈
• 机 构: 400010 重庆医科大学附属第二医院消化科（现地址：400016 重庆医科大学附属第一医院消化内科）,400010 重庆医科大学附属第二医院肝炎研究所,400010 重庆医科大学附属第二医院消化科,
• 出 处: 中华微生物学和免疫学杂志
• 发表日期: 1999年19期
• 关键词: 真核表达载体 乙肝病毒 肝细胞癌 肝癌细胞株 基因片段 乙型肝炎病毒 重组载体 读码框 限制性内切酶 抗性克隆细胞

目的

为探讨HBV X基因在肝细胞癌（HCC）中的致瘤机理提供实验模型。

方法

用限制性内切酶从pEcob6上切下X基因读码框，克隆到pBKS⁺上，再将X片段插入pCEP4的Hind Ⅲ和Not Ⅰ位点间。将重组载体（pCEP4-X）和空载体（pCEP4）导入肝癌细胞株HepG2中，潮霉素选择培养，RT-PCR鉴定其稳定表达。

结果

构建的pCEP4-X质粒在HepG2细胞中有稳定表达。

结论

本实验为进一步探讨HBV X基因在HCC中的致瘤机理提供了理想的实验细胞株。