银鲫与彩鲫卵母细胞cDNA文库构建及周期蛋白A1的cDNA克隆

• 作 者: 樊连春 谢京
• 机 构: 中国科学院水生生物研究所武汉,淡水生态与生物技术国家重点实验室
• 出 处: 水生生物学报
• 发表日期: 2000年6期
• 关键词: 雌核发育 银鲫 彩鲫 CDNA文库 周期蛋白A1
• 基金项目: 国家自然科学基金!(批准号 :3970 0 0 70 ,39730 2 90 ,3982 30 0 3),国家重点基础研究项目!(G1 9990 5390 8),中国科学院基础研究

分别取行天然雌核发育繁殖的银鲫和两性生殖的彩鲫的卵母细胞为材料，提取总ＲＮＡ，分离ｍＲＮＡ，进而反转录合成ｃＤＮＡ并定向插入λｇｔｌｌ Ｓｆｉ－Ｎｏｔ克隆载体，经体外包装构建了银鲫卵母细胞的表达型ｃＤＮＡ文库。测试结果表明库容量分别达到３．１×１０＾６（银鲫）和１．６×１０＾６（彩鲫）。进一步人工合成Ｃｙｃｌｉｎ Ａ１保守引物，采用ＰＣＲ扩增文库的方法，克隆了银鲫（１６１６ｂｐ）与彩鲫（１６２６ｂ