【摘 要】
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目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎症小体介导的白细胞介素-1β（IL-1β）等炎性因子释放在大鼠光气致急性急性肺损伤（ALI）发病机制中的作用。方法将20只大鼠随机分为2组，空气对照组（吸入与光气染毒组同等流量的空气）10只，光气染毒组（吸入8.33 mg/L纯度为100%的光气5 min）10只。染毒6 h后收集血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织。制作肺脏石蜡切片
【机 构】
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目的探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）炎症小体介导的白细胞介素-1β（IL-1β）等炎性因子释放在大鼠光气致急性急性肺损伤（ALI）发病机制中的作用。
方法将20只大鼠随机分为2组，空气对照组（吸入与光气染毒组同等流量的空气）10只，光气染毒组（吸入8.33 mg/L纯度为100%的光气5 min）10只。染毒6 h后收集血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）和肺组织。制作肺脏石蜡切片，HE染色观察形态学改变，免疫组化检测肺组织中NLRP3蛋白表达水平。蛋白质免疫印迹试验（Western blot）技术和反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1（caspase-1）mRNA和蛋白的表达。采用双抗体夹心酶标免疫分析法（ELISA法）测定各组血清和BALF中IL-1β、IL-18和IL-33水平；反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法对肺组织IL-1β、IL-18和IL-33 mRNA水平进行半定量研究。
结果成功复制光气吸入性肺损伤模型。染毒6h后HE染色形态学观察可见，光气染毒组肺组织中有大量炎性细胞浸润，免疫组化染色结果显示，光气染毒组大鼠肺泡间隔增厚，肺组织中可见较多NLRP3阳性细胞。与空气对照组（mRNA：NLRP3为21.49±1.44，Caspase-1为23.38±1.37；蛋白含量的相对值：NLRP3为0.090 6±0.025 7，Caspase-1为0.094 2±0.034 6）比较，光气染毒组肺组织中NLRP3和caspase-1 mRNA和蛋白表达量（mRNA：NLRP3为28.19±1.11，caspase-1为28.67±0.89；蛋白含量的相对值：NLRP3为0.655 6±0.171 4，caspase-1为0.964 1±0.284 6）明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）；ASC mRNA和蛋白表达量无明显变化，差异无统计学意义（P>0.05）。与空气对照组（肺组织mRNA：IL-1β为15.25±0.72、IL-18为23.16±0.60、IL-33为22.48±1.25；血清IL-1β为109.6±1.9、IL-18为36.12±1.49、IL-33为11.30±1.27；BALF：IL-1β为170.4±3.0、IL-18为48.15±3.08、IL-33为21.00±1.43）比较，光气染毒组肺组织IL-1β、IL-18和IL-33 mRNA（IL-1β为22.68±1.16、IL-18为30.35±1.23、IL-33为31.44±1.21）表达量明显升高，血清和BALF中IL-1β、IL-18和IL-33蛋白含量（血清：IL-1β为418.7±13.9、IL-18为140.4±5.0、IL-33为25.70±1.16；BALF：IL-1β为615.8±24.9、IL-18为151.60±6.38、IL-33为38.30±1.248）明显升高，差异均有统计学意义（P<0.01）。
结论NLRP3炎症小体介导炎性反应可能参与了光气致急性肺损伤的发病过程，可能是急性肺损伤的发病机制之一。
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